2020 年度実施状況報告書

肝内胆管癌に対するNOTCH/YAP経路のクロストーク制御を介する新規治療の開発

研究課題

研究課題/領域番号	19K17473
研究機関	奈良県立医科大学
研究代表者	才川宗一郎奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (10790347)
研究期間 (年度)	2019-04-01 – 2022-03-31
キーワード	肝内胆管癌
研究実績の概要	2020年度は2019年度に作製したヒト肝内胆管癌株(HuCCT-1, KKU-M213)を用いたxenograft(１.無治療群、２.ARB単剤投与群、３.NOTCH1阻害薬単独投与群、４.ARB+NOTCH1阻害薬併用群)皮下腫瘍の病理学的、分子生物学的検討を行った。In vitroでの結果を反映して、ARB単独群、NOTCH1阻害薬単独群では腫瘍内のKi67陽性の腫瘍細胞の増殖が有意に抑制され、TUNEL陽性のアポトーシス細胞が有意に増加していた。また、両剤併用群では細胞増殖抑制、アポトーシス誘導が各単剤群に比べて顕著であった。興味深いことに、NOTCH1阻害薬単独群においてもYAP活性を反映する下流のCTGF,CYR61, ANKRD1, MFAP5のmRNA発現レベルは低下を認め、NOTCH1-YAPのpathwayの抑制が関与している可能性が考えられた。一方で、ARB単独群におけるNOTCHシグナルの抑制は認められなかった。さらに、ARB単独群、NOTCH1阻害薬単独群、併用群において皮下腫瘍内のCD34陽性血管新生が有意に抑制されていた。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由 2020年度は基礎検討を中心に行う予定としており、仮説を証明し得る結果が得られている。
今後の研究の推進方策	マウス研究において、各群の皮下腫瘍サンプルを用いてtranscriptome解析を行い、治療前後で変化する遺伝子群の中でNOTCH1経路、Hippo/YAP経路に関連する遺伝子を探索、同定する。また、化学療法前の肝内胆管癌患者の腫瘍生検サンプルを用いて、同定したマーカーが治療効果予測に有用であるかを治療効果、予後と比較することにより臨床的にretrospective に検証する。臨床検体での検証には肝内胆管癌患者の腫瘍生検凍結、病理検体を保存しているためそれを使用する。必要あれば引き続き検体採取を行い、同時並行で臨床データ収集を行う。
次年度使用額が生じた理由	COVID-19の影響により、今年(2020年度)に行う予定としていた委託でのtranscriptome解析が滞り、翌年度(2021年度)に行う予定となったため、予算の持ち越しとなった。