J-MICC STUDYとの共同研究にて、コホート登録時の採血後2年以内に膵臓癌と診断された研究対象者(21例、以下、膵臓癌患者という)と健常者(21例)の血清サンプルを使用し、ctDNA(KRAS G12)の検出について検討した。用意した血清サンプル(150μL)から、cfDNAを抽出し、Pyrrole-Imidazole Polyamide(PIP)によるctDNAの濃縮操作を行い、デジタルPCRによってctDNA(KRAS G12)を測定した。 膵臓癌患者(21例)の背景は、男性16名:女性5名、平均年齢65.4歳、抽出したcfDNA量1480±801pg/Sampleであった。健常者(21例)の背景は、男性16名:女性5名、平均年齢65.5歳、抽出したcfDNA量1383±1333pg/Sampleであった。 サンプル毎のMutant KRASのコピー数は、膵臓癌患者で2.58±5.14Copies/Sample、健常者で1.70±2.36Copies/Sampleであった。cfDNA中のMutant KRASのコピー数は、膵臓癌患者で0.00624±0.00734Copies of Mutant KRAS/pg of cfDNA、健常者で0.00664±0.00753Copies of Mutant KRAS/pg of cfDNAであった。 PIP濃縮後のctDNA(KRAS G12)のコピー数は、膵臓癌患者と健常者間に有意な差はなく、血清サンプルを用いたmutant KRASの検出は早期膵臓癌患者の発見に寄与しない可能性が示唆された。
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