Calreticulin変異での骨髄増殖性疾患に伴う肺高血圧症のメカニズム解明

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 19K17532
• 研究機関: 福島県立医科大学
• 研究代表者: 横川 哲朗 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (80748773)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 肺高血圧症 / Calreticulin変異

研究実績の概要

CALR変異ノックインマウスの骨髄細胞を、レシピエントである野生型マウスに骨髄移植を行った。骨髄移植後のレシピエントマウス（CALR変異骨髄移植後マウス）を通常酸素で飼育したところ、肺高血圧は呈さなかった。しかし、CALR変異骨髄移植後マウスを低酸素チャンバーで飼育したところ、右室圧の上昇と、右室/左室重量比の増大が生じ、肺高血圧症を呈した。さらに、野生型マウスの骨髄細胞を、レシピエントである野生型マウスに骨髄移植したマウスよりも、CALR変異骨髄移植後マウスでは肺高血圧症の重症度が悪化した。現在、CALR変異骨髄移植後マウスが肺高血圧症を呈するメカニズムを、マウスの肺組織、肺から抽出した蛋白質、RNAを用いて、免疫染色、ウェスタンブロット法、リアルタイムPCR法などで解析を進めている。

また、当院循環器内科に入院した肺高血圧症患者（骨髄増殖性疾患合併患者を含む）において、末梢血から抽出したDNAで、アリル特異的リアルタイムPCR法にて、CALR変異の有無解析を進めている。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

マウスの骨髄移植実験や、肺高血圧症の解析実験が進展し、CALR変異における肺高血圧症のメカニズム解析を行う段階まで実験が進んでいる。

今後の研究の推進方策

CALR変異ノックインマウスを用いて、CALR変異に伴う肺高血圧症のメカニズム解析をin vivoで行う。さらに、CALR変異ノックインマウス由来骨髄細胞を用いて、in vitroでの解析も行う。

研究成果

• [雑誌論文] A case of pulmonary hypertension and hereditary hemorrhagic telangiectasia related to an ACVRL1 mutation. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Sugimoto K, Kimishima Y, Misaka T, Yoshihisa A, Morisaki H, Yamada O, Nakazato K, Ishida T, Takeishi Y.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 59 ページ: 221-227
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.3625-19
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Significance of pulmonary vascular resistance and diastolic pressure gradient on the new definition of combined post-capillary pulmonary hypertension. (2020)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto K, Yoshihisa A, Nakazato K, Yokokawa T, Misaka T, Oikawa M, Kobayashi A, Yamaki T, Kunii H, Ishida T, Takeishi Y.
  • 雑誌名: Int Heart J 巻: 61 ページ: 301-307
  • DOI: 10.1536/ihj.19-476
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Clinical significance of circulating cardiomyocyte-specific cell-free DNA in patients with heart failure: a proof-of-concept study. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Misaka T, Kimishima Y, Shimizu T, Kaneshiro T, Takeishi Y.
  • 雑誌名: Can J Cardiol 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1016/j.cjca.2019.10.016.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Residual Gensini score is associated with long-term cardiac mortality in patients with heart failure after percutaneous coronary intervention. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Yoshihisa A, Kiko T, Shimizu T, Misaka T, Yamaki T, Kunii H, Nakazato K, Ishida T, Takeishi Y.
  • 雑誌名: Circ Rep 巻: 2 ページ: 89-94
  • DOI: 10.1253/circrep.CR-19-0121
  • 査読あり / オープンアクセス