Calreticulin変異での骨髄増殖性疾患に伴う肺高血圧症のメカニズム解明

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19K17532
• 研究機関: 福島県立医科大学
• 研究代表者: 横川 哲朗 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (80748773)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: CALR変異 / 肺高血圧症 / 骨髄増殖性疾患

研究実績の概要

Calreticulin（CALR）変異は2013年に報告された、骨髄増殖性疾患（真性赤血球増多症、本態性血小板血症、骨髄線維症）の2番目に多い遺伝子変異の一つである。骨髄増殖性疾患は肺高血圧症をしばしば合併する。肺高血圧症は骨髄増殖性疾患における予後不良因子の一つであるが、その発症メカニズムについては不明である。今回、CALR変異ノックインマウスを用いて、骨髄由来CALR変異陽性細胞の肺高血圧症における意義を検討した。当施設で有するCRISPR-Cas9法によって作成した2種類のCALR変異ノックインマウスの内、本態性血小板血症と似た病態を呈する10-deletionのCALR変異ノックインマウスを用いた。結果、骨髄由来CALR変異が、肺動脈中膜肥厚を伴って、低酸素誘導性肺高血圧症モデルを悪化させ、エンドセリン1の肺における発現を上昇させた。さらに、低酸素誘導性モデルマウスの肺動脈周囲にはマクロファージが浸潤していたため、マクロファージを用いたin vitroの実験を行った。CALR変異ノックインマウスの骨髄細胞を培養し、CALR変異陽性-骨髄由来マクロファージを作成。そのマクロファージでエンドセリン1の発現やSTAT3のリン酸化が増加していた。以上の結果より、CALR変異陽性骨髄細胞が、マクロファージやエンドセリン1を介したメカニズムによって、肺高血圧症を増悪させることを明らかとした。本研究成果は論文にて報告した。
また、循環器疾患患者におけるCALR変異の頻度をリアルタイムPCR法にて調べたが、循環器内科へ通院中の肺高血圧症患者において、CALR変異のアレルバーデンが高値となる患者を認めなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Clonal hematopoiesis and JAK2V617F mutations in patients with cardiovascular disease. (2021)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Misaka T, Kimishima Y, Wada K, Minakawa K, Kaneshiro T, Yoshihisa A, Ikeda K, Takeishi Y.
  • 雑誌名: JACC: CardioOncology 巻: 3 ページ: 134-136
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Myeloproliferative neoplasm-driving Calr frameshift promotes the development of pulmonary hypertension in mice. (2021)
  • 著者名/発表者名: Minakawa K, Yokokawa T, Ueda K, Nakajima O, Misaka T, Kimishima Y, Wada K, Tomita Y, Miura S, Sato Y, Miura K, Sugimoto K, Nakazato K, Nollet KE, Ogawa K, Ikezoe T, Hashimoto Y, Takeishi Y, Ikeda K.
  • 雑誌名: J Hematol Oncol 巻: 14 ページ: 52
  • DOI: 10.1186/s13045-021-01064-8.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Crucial role of hematopoietic JAK2V617F in the development of aortic aneurysms. (2021)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Misaka T, Kimishima Y, Wada K, Minakawa K, Sugimito K, Ishida T, Morishita S, Komatsu N, Ikeda K, Takeishi Y.
  • 雑誌名: Haematologica 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.3324/haematol.2020.264085.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Anti-mitochondrial antibodies in patients with dilated cardiomyopathy. (2021)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Yoshihisa A, Misaka T, Sato T, Kaneshiro T, Oikawa M, Kobayashi A, Yamaki T, Kunii H, Takeishi Y.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 60 ページ: 201-208
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.5422-20.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Endothelin-1 upregulates activin receptor-like kinase-1 expression via G i/RhoA/Sp-1/Rho kinase pathways in human pulmonary arterial endothelial cells. (2021)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto K, Yokokawa T, Misaka T, Kaneshiro T, Yamada S, Yoshihisa A, Nakazato K, Takeishi Y.
  • 雑誌名: Front Cardiovasc Med 巻: 8 ページ: 648981
  • DOI: 10.3389/fcvm.2021.648981.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] JAK2V617F-positive myeloproliferative neoplasm is associated with aortic aneurysm (2021)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Misaka T, Kimishima Y, Wada K, Sugimoto K, Ishida T, Takeishi Y.
  • 学会等名: 第85回 日本循環器学会学術集会
• [学会発表] Clinical significance of myeloproliferative neoplasm driver mutation-mediated clonal hematopoiesis in patients with cardiovascular diseases (2021)
  • 著者名/発表者名: 和田健斗, 三阪智史, 横川哲朗, 君島勇輔, 皆川敬冶, 義久精臣, 池田和彦, 竹石恭知
  • 学会等名: 第85回 日本循環器学会学術集会
• [学会発表] Crucial role of Jak2V617f-positive myeloproliferative neoplasm in the development of aortic aneurysm. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Misaka T, Kimishima Y, Wada K, Minakawa K, Sugimoto K, Ishida T, Ikeda K, Takeishi Y.
  • 学会等名: American Heart Association Scientific Session 2020
  • 国際学会
• [学会発表] Clinical significance of clonal hematopoiesis with JAK2V617F in patients with cardiovascular diseases (2020)
  • 著者名/発表者名: Wada K, Misaka T, Yokokawa T, Kimishima Y, Minakawa K, Kaneshiro T, Yoshihisa A, Ikeda K, Takeishi Y
  • 学会等名: American Heart Association Scientific Session 2020
  • 国際学会
• [学会発表] Endothelin-1 increases ACVRL-1 expression at the transcriptional and post-transcriptional levels in human pulmonary arterial endothelial cells via Gi, RhoA and Rho kinase pathway with involvement of Sp-1 (2020)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto K, Yokokawa T, Misaka T, Yokokawa S, Nakazato K, Ishida T, Takeishi Y
  • 学会等名: American Heart Association Scientific Session 2020
  • 国際学会
• [学会発表] Hematopoietic JAK2V617F mutation exacerbates aortic aneurysm development. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Misaka T, Kimishima Y, Wada K, Minakawa K, Sugimoto K, Ishida T, Ikeda K, Takeishi Y.
  • 学会等名: The 64th Annual Scientific Meeting of The Korean Society of Cardiology
  • 国際学会
• [学会発表] Clinical significance of clonal hematopoiesis with JAK2V617F in patients with cardiovascular disease (2020)
  • 著者名/発表者名: Wada K, Misaka T, Yokokawa T, Kimishima Y, Minakawa K, Kaneshiro T, Yoshihisa A, Ikeda K, Takeishi Y
  • 学会等名: The 4th JCS Council Forum on Basic CardioVascular Research
• [学会発表] Crucial role of hematopoietic JAK2V617F mutation in the development of aortic aneurysms (2020)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa T, Misaka T, Kimishima Y, Wada K, Minakawa K, Sugimoto K, Ishida T, Ikeda K, Takeishi Y.
  • 学会等名: The 4th JCS Council Forum on Basic CardioVascular Research