| 研究課題/領域番号 |
19K17641
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
爲近 真也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (00638603)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | ヒト化マウス / 間質性肺炎 / 急性肺障害 / CD25 / 制御性T細胞 |
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| 研究実績の概要 |
間質性肺炎(IP)は、様々な原因により生じ、未だ発症機序も不明な点が多く難治性のため、新しい治療法の確立が急がれる。本研究では、ヒト化マウスにヒトCD25を刺激をすることで急性にIPが生じるモデルマウスを用いて、ヒトCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことが目的である。
本研究では、ヒトCD25刺激のために、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）を使用している。
前年度は、hIL-2cxによるヒト制御性T細胞（Treg）に対する効果を、in vitroにて、Treg suppression asssayを施行することで検討した。その結果、hIL-2cxにより増加したTregにも抑制能があることが分かった。また、Bruker Skyscan 1276を使用して、マウス肺のCT画像を撮影し、hIL-2cx投与では、すりガラス影や牽引性の管支張を認めたが、抗ヒトCD25抗体（anti-hCD25 Ab：basiliximab）の併用により、改善を認めた。
本年度は、NOGマウスにヒトPBMCを静注後、day7にPBS、hIL-2cxを腹腔内に投与し、day 14に解剖し、脾臓と肺のヒトPBMCの解析を行った。その結果、肺において、PBSと比べて、hIL-2cxを投与してもCD8+T細胞の増加を認めなかった。また、脾臓と比べて、PBS・hIL-2cx投与に関わらず、肺では、CD4+T細胞・CD8+ T細胞におけるCD25陽性細胞の割合は少なかった。つまり、hIL-2cxによるCD25刺激にも関わらず、肺ではCD25陽性細胞の浸潤は少ないことが分かった。また、hIL-2cxによる刺激にて、脾臓のみならず、肺にもhIFN-γ、hTNF-αなどのヒト炎症性サイトカイン産生細胞を認めた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究では、ヒトPBMCをNOGマウスに移入後、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）を投与し、その後、間質性肺炎（IP）が生じたマウス肺に浸潤した細胞をFACSや病理にて検討することで、ヒトCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことを目的としている。
本年度は、PBS、hIL-2cxのヒト化マウスの肺における影響を、FACSにて検討した。現在、hIL-2cxにステロイドであるデキサメタゾン（Dexa）や抗ヒトCD25抗体（anti-hCD25 Ab：basiliximab）を併用し、肺への効果を検討している。
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| 今後の研究の推進方策 |
本年度は、PBS、hIL-2cxのヒト化マウスの肺における影響を、FACSにて検討したが、今後も解析を続けていく。現在、hIL-2cxにステロイドであるデキサメタゾン（Dexa）や抗ヒトCD25抗体（anti-hCD25 Ab：basiliximab）を併用し、肺に対する効果を検討している。今後は、FACS以外に、病理でも炎症細胞浸潤や線維化の程度について検討する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は、ヒトIL-2と抗ヒトIL-2抗体（clone 5344）からヒトILL-2 complex（hIL-2cx）を作成し、ヒト化マウスに投与することで、急性に間質性肺炎を出現させ、FACSにて肺に浸潤する細胞を検討した。今後、肺病理にて、炎症細胞浸潤や線維化についても検討を予定しいる。これまでの検討にて、既に数体のヒト化マウスの肺をホルマリンにて固定しているが、まだ十分な数ではないため、さらに追加のNOGマウスによる検討が必要である。そのため、追加のNOGマウス、病理作成費に残った科研費を用いる予定である。
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