| 研究課題/領域番号 |
19K17641
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
爲近 真也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (00638603)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | ヒト化マウス / 間質性肺炎 / 急性肺障害 / CD25 / 炎症性サイトカイン / デキサメタゾン |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、ヒト化マウスにヒトCD25(hCD25)を刺激をすることで急性に間質性肺炎(IP)が生じるモデルマウスを用いて、hCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことが目的である。hCD25刺激のために、ヒトIL-2（hIL-2）と抗hIL-2抗体(clone 5344)によるhIL-2 complex（hIL-2cx）を使用した。
前年度は、NOGマウスにヒト末梢血単核球(hPBMC)を静注後、day7にPBS、hIL-2cxを腹腔内に投与し、day 14に解剖し、脾臓と肺のhPBMCの解析を行った。hIL-2cxによるhCD25刺激にも関わらず、肺ではhCD25陽性細胞の浸潤は少なく、ヒト制御性T細胞は認めなかった。またhIL-2cx刺激にて、脾臓のみならず、肺にもhIFN-γ、hTNF-αなどのヒト炎症性サイトカイン産生T細胞を認めた。
本年度は、肺に浸潤するhCD4+T細胞、hCD8+T細胞のヒト炎症性サイトカインの産生に関して、詳細に検討した。またデキサメタゾン(Dex) 5mg/kg/日をday 9-13まで腹腔内に投与し、NOGマウスの急性肺障害に対する影響を検討した。
その結果、hIL-2cxにより、肺に浸潤するhCD4+T細胞でのhIFN-γ、hIL-4、hTNF-αの産生、hCD8+T細胞でのhIFN-γ、GM-CSFの産生の有意な増加を認めた。またhIFN-γ、hTNF-α、hGM-CSFの3つのサイトカインを同時産生するhCD4+T細胞・hCD8+T細胞の有意な増加を認めた。これらのサイトカイン産生は、Dexにより有意な改善を認めなかった。さらに、PBSと比べて、hIL-2cxにより有意にヒト化マウスの生存率の低下や、day 14での肺病理にて肺炎増悪を認めたが、どちらもDex投与では有意な改善を認めなかった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本研究では、ヒトPBMCをNOGマウスに移入後、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）を投与し、その後、間質性肺炎（IP）が生じたマウス肺に浸潤した細胞をFACSや病理にて討することで、ヒトCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことを目的としている。
本年度は、PBS、hIL-2cxのヒト化マウスの肺における影響や、ステロイドであるデキサメタゾン（Dex）追加の効果の検討をしたが、解析に時間がかかったため、少し予定よりも遅れてしまった。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度は、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）により生じたヒト化マウスでの急性肺障害を、ステロイドであるデキサメタゾン(Dex)では抑えきることができないことが分かったため、ヒト炎症サイトカインをマルチに抑制可能なJAK阻害薬を追加し、肺における影響を、FACSや病理にて検討していく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本研究では、ヒトPBMCをNOGマウスに移入後、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）を投与し、その後、間質性肺炎（IP）が生じたマウス肺に浸潤した細胞をFACSや病理にて討することで、ヒトCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことを目的としている。
本年度は、PBS、hIL-2cxのヒト化マウスの肺における影響や、ステロイドであるデキサメタゾン（Dex）追加の効果の検討をしたが、解析に時間がかかったため、少し予定よりも遅れてしまったため、使用額が少なかった。
次年度は、hIL-2cxにより生じたヒト化マウスでの急性肺障害を、Dexでは抑えきることができないことが分かったため、ヒト炎症サイトカインをマルチに抑制可能なJAK阻害薬を追加し、肺における影響を、FACSや病理にて検討する予定のため、その解析に使用予定である。
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