重症薬疹の病態におけるγ-chain の役割

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 19K17779
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 渡邉 裕子 (國見裕子) 横浜市立大学, 附属病院, 助教 (10567605)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 重症薬疹 / Stevens-Johnson症候群 / 中毒性表皮壊死症 / バイオマーカー / 血清γ chain subunit

研究実績の概要

Stevens-Johnson症候群(SJS)および中毒性壊死症(TEN)の患者血清を用いてγ-chain subunit値をELISA測定したところ、血清γ-chain subunit値は健常人コントロール群および通常の薬疹群と比較してSJS/TEN患者で有意に高く、特により重症なTEN患者で高値であった。臨床的特徴と血清γ-chain subunit値の解析では、SJS/TENの重症度と血清γ-chain subunit値が相関することが明らかとなった。SJS/TENの後遺症・死亡といった予後不良歴では、予後良好例と比較してγ-chain subunit値が有意に高値であった。また、皮疹の改善に伴い血清γ-chain subunit値も低下することから重症度や病勢のバイオマーカーとして有用な可能性が示唆された。SJS/TEN患者の皮膚組織においても、健常人と比較してSJS/TEN患者の表皮ではγ-chain subunitが有意に強く発現していることが明らかとなった。現在、in vitroの研究として、プライマリーケラチノサイトを用いて、γ-chain subunitおよびIL-2ファミリーサイトカインの共刺激実験を含むγ-chain subunitの機能実験を行っている。その他の細胞障害性因子との相互作用についても検討中である。健常人から採取したPBMCを用いた、γ-chain subunitの機能解析を準備中である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

Stevens-Johnson症候群(SJS)および中毒性壊死症(TEN)の患者血清を用いてγ-chain subunit値はELISA測定済である。血清γ-chain subunit値は健常人コントロール群および通常の薬疹群と比較してSJS/TEN患者で有意に高く、特により重症なTEN患者で高値であった。臨床的な解析では、血清γ-chain subunit値と表皮剥離面積、入院期間、重篤な粘膜疹といったSJS/TENの重症度との正相関がみられ、さらに重篤な後遺症を残した症例、死亡例では有意に高値を示した。SJS/TENの治療前後で皮疹の改善に伴い、血清γ-chain subunit値の低下がみられた。また、SJS/TENの他のバイオマーカーについても検討をおこない、血清granulysin値と血清γ-chain subunit値は正相関の関係がみられた。SJS/TEN患者の皮膚組織についての検討では、検体数を増やして染色を行い、immunohistochemical score を用いて評価した。健常人と比較してSJS/TEN患者の表皮ではγ-chain subunitが有意に強く発現していることが明らかとなった。in vitroの研究として、プライマリーケラチノサイトを用いて、γ-chain subunitおよびIL-2ファミリーサイトカインの共刺激実験を行い、炎症性サイトカイン、表皮細胞のアポトーシス誘導について検討している。その他の細胞障害性因子との相互作用についても検討中である。また、健常人のPBMCを採取し、γ-chain subunitの刺激実験を予定している。

今後の研究の推進方策

血清γ-chain subunit値と臨床解析はほぼ完了しており、2022年度はin vitroの実験系として引き続きプライマリーケラチノサイトおよび健常人から採取したPBMCを用いた実験を予定している。プライマリーケラチノサイトまたはPBMCへのγ-chain subunit、IL-2、IL-15といったIL-2 family proteinの単独および共刺激の実験、γ-chain subunitを過剰発現させたケラチノサイト（またはPBMC）における細胞障害性タンパク産生能、炎症性サイトカイン産生、リンパ球の遊走能、アポトーシス能などを確認している。in vitroの実験結果が出そろった時点での論文作成を予定している。

次年度使用額が生じた理由

今年度はコロナ流行によって、物品流通の問題や自身の欠勤が細胞実験が止まることがあった。次年度、今年度行えなかった実験についての物品や試薬購入に使用する予定である。