研究課題/領域番号 |
19K18080
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研究機関 | 名古屋大学 |
研究代表者 |
田中 伸孟 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院助教 (30791066)
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研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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キーワード | 膵癌 / 軸索誘導 / Slit/Robo signaling / 予後 / バイオマーカー |
研究実績の概要 |
軸索誘導(axon guidance)は発生の段階で神経回路形成が適切に行われるための重要なプロセスである。軸索誘導に関わる遺伝子群は各種癌の発生・進展にも関わるとされ、さらに膵癌は神経周囲浸潤が特徴的であるため、軸索誘導関連遺伝子として代表的な遺伝子ファミリーについて公共データベースThe Cancer Genome Atlasの遺伝子情報を用いて解析を行った。軸索誘導に関連するSlit/Robo signaling pathwayに関連するROBOは膜貫通型受容体の一つであり、SLITはこのシグナル伝達機構におけるリガンドである。このROBOファミリーおよびSLITファミリーは軸索誘導に関連するだけでなく、細胞接着・細胞極性・細胞骨格等の現象にも関連するとされており、膵癌における発癌・進展に重要な役割を果たす可能性がある。SLIT/ROBOファミリーにはROBO1~4、SLIT1~3の分子が存在する。これらについてThe Cancer Genome AtlasのRNA-seqデータにおける膵癌腫瘍部・非腫瘍部の発現を解析するとROBO4の発現が腫瘍部で有意に低い結果であった。さらに腫瘍部でのROBO4低発現は予後不良な経過と関連していたため、膵におけるROBO4低下が発癌及び腫瘍学的悪性度の進展に重要であると確認した。術前治療(化学療法及び化学放射線療法)を施行していない膵癌症例168例について有望な分子について免疫組織学的染色を行い、再発・予後等を含めた臨床病理学的情報の結果を収集し、関連を解析中である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
軸索誘導に関連する遺伝子の候補を抽出したが、該当遺伝子がコードするタンパク質の免疫染色に用いる抗体の準備・条件設定、および術前治療を施行していない膵癌症例について臨床情報・切除標本の状態確認を行った上でのFFPEの薄切等に時間を要したため、当初の計画よりもやや遅れが生じている。
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今後の研究の推進方策 |
①該当分子の免疫染色の結果をスコア化し、臨床病理学的所見や予後等の臨床情報との関連を調査する。 ②有望な遺伝子については細胞株を用いた機能解析等を検討する。該当遺伝子の過剰発現および発現消失系を作成し、癌の増殖・浸潤・遊走能の変化等を検証する。また過剰発現や発現消失によって起こる細胞分子学的変化をRNA-seq等の網羅的解析技術をもちいて検証することを検討する。 ③当科で保有する膵癌組織検体から抽出したRNAライブラリーを用い、定量PCRの手法を用いてmRNAレベルでの発現状況を調査する。 ④得られた成果は論文作成・学会発表と通して社会に発信する。
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次年度使用額が生じた理由 |
(理由) 免疫染色の対象症例の選別・FFPEの薄切等に時間を要したため、初年度に予定していた細胞株による強制発現、発現消失系の作成実験等に遅れが生じたため。 (使用計画) 初年度に予定していた膵癌細胞株における強制発現、発現消失系の実験を行うための費用とする。また、化学療法耐性株の作成および耐性株を用いた該当分子の機能解析を行う費用にも使用する予定である。
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