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胆道がんは、現在もなお予後不良の疾患であり、当教室においての肝内胆管癌の臨床検体症例、関連施設との連携をもとに多数の症例を解析し、ARID1A陽性症例は予後不良であることを確認した。
CRISPR/Cas9 systemを改良し、ARID１Aのノックアウトを作成できるようにし、ヒト肝内胆管がんの細胞株HuCCT-1、RBEにおいて、ARID1Aのノックアウト株を作成した。in vitroの解析にて、遊走能・浸潤能についてノックアウト細胞株で増加がみられていることを確認した。sphere formationにおいて、幹細胞性がある傾向にあることを示した。
ノックアウト細胞株において遺伝子解析を進め、マイクロアレイassayを用いてノックアウト細胞株ではALDH１Aの上昇を示した。
浸潤能や増殖能の増加とともに、幹細胞性の上昇によって、造腫瘍性の獲得につながっている。胆道癌領域で用いられているゲムシタビンとの感受性は、陽性症例において感受性が増す傾向にあることを確認し、更なる成果を求めた。ほかの薬剤（5-FU）や、最近話題となっている分子標的薬・免疫チェックポイント阻害薬との検討も進めた。予後不良例となっているARID1A陽性症例の予後改良につながる薬剤の可能性も広げることにつなげた。
In vivoにおけるマウス皮下腫瘍モデルについては、マウスへの細胞の生着が見られず、腫瘍形成と、そこから先の主要免疫・薬剤感受性に関する検討ができなかった。
今回、ノックアウト作成に使用したCRISPR/Cas9 systemに関して、他の癌腫の細胞に対しても応用が可能であり、肝細胞癌、胃がんなどの細胞について、原因遺伝子やがん抑制遺伝子などの操作への応用を進めた。肝細胞癌についてはβ-catenineと免疫応答の関係性などの解析に発展させることができた。
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