転写因子p53によるSF1/Ad4BPを介した性機能調節機構

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 19K18631
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 原口 広史 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (50804506)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 卵巣 / 顆粒膜細胞 / Mdm2 / p53 / 卵子成熟 / 卵丘膨化 / SF1/Ad4BP / マウスモデル

研究実績の概要

卵巣のMdm2欠損マウス（Mdm2 cKO）は排卵障害による不妊となり、Mdm2/p53の2重欠損マウス（Mdm2/p53 cDKO）では正常な排卵の表現型を示すこと、Mdm2欠損マウスでは、卵子成熟の過程である卵丘膨化と卵子成熟の指標である卵核胞崩壊が障害されていた。マウス卵丘顆粒膜細胞を用いたマイクロアレイと定量的PCRの結果から、卵巣のMdm2欠損マウスの卵丘顆粒膜細胞で低下し、p53/Mdm2 の2重欠損マウスの卵丘顆粒膜細胞では低下を認めない遺伝子としてSF1（Nr5a1）を見出し、ChIPアッセイにてそのプロモーター領域にp53が結合することを確認した。卵巣におけるMdm2欠損によるp53の増加は卵子成熟を障害すること、p53の転写調節因子としてSF1が機能している可能性が示唆された。卵巣のコンディショナルノックアウトマウスを用いた解析で、p53増加を介した卵子成熟の過程の異常および不妊との関連が明らかとなり、p53のターゲット因子の抽出まで成功しており、予想以上に研究が進展した。今後は細胞株を用いたメカニズム解析、ヒト検体を用いた解析を進め、ヒト不妊とMdm2、p53、SF1との関連性を明らかにする方針である。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

卵巣のコンディショナルノックアウトマウスを用いた解析で、p53増加を介した卵子成熟の過程の異常および不妊との関連が明らかとなり、p53のターゲット因子の抽出まで成功しており、予想以上に研究が進展した。

今後の研究の推進方策

細胞株を用いたメカニズム解析、ヒト検体を用いた解析を進め、ヒト不妊とMdm2、p53、SF1との関連性を明らかにする方針である。

次年度使用額が生じた理由

Mdm2欠損マウスの繁殖において、当初の想定に反し実験に必要な成体数を得られず研究が3か月遅延した。そのため次年度使用額が生じた。次年度使用額は、繁殖期間延長に伴うマウスの管理費とその解析を行うための試薬・消耗品の購入費にあてる。当該年度に遅延した内容の研究は次年度に行い、合わせて当初から次年度に行う予定であった研究を次年度内に完了するように研究を推進する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] 子宮粘膜下筋腫に対しGnRHアンタゴニストを使用して多量出血をきたした1例 (2020)
  • 著者名/発表者名: 石沢千尋, 浦田陽子, 真壁友子, 原口広史, 矢野倫子, 松尾光徳, 宮下真理子, 金谷真由子, 森嶋かほる, 廣田泰, 大須賀穣, 藤井知行
  • 雑誌名: 東京産科婦人科学会会誌 巻: 69 ページ: 23-28
  • 査読あり
• [雑誌論文] Levonorgestrel Inhibits Embryo Attachment by Eliminating Uterine Induction of Leukemia Inhibitory Factor. (2020)
  • 著者名/発表者名: Matsuo M, Hirota Y, Fukui Y, Fujita H, Saito-Fujita T, Kaku T, Gebril M, Hirata T, Akaeda S, Hiraoka T, Tanaka T, Haraguchi H, Saito-Kanatani M, Shimizu-Hirota R, Takeda N, Fujii T, Osuga Y.
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: 46 ページ: pii: bqz005
  • DOI: 10.1210/endocr/bqz005
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 【子宮頸部の生理と病理】子宮頸部の生理 子宮頸部の周期的変化 (2019)
  • 著者名/発表者名: 原口広史、廣田泰
  • 雑誌名: HORMONE FRONTIER IN GYNECOLOGY 巻: 26 ページ: 17-20
• [雑誌論文] 月経随伴症状を有する子宮腺筋症に対する子宮腺筋症病巣除去術の効果 (2019)
  • 著者名/発表者名: 賀来哲明, 廣田泰, 福井大和, 大村恵里香, 赤枝俊, 平岡毅大, 松尾光徳, 原口広史, 大須賀穣, 藤井知行
  • 雑誌名: 産科と婦人科 巻: 86 ページ: 767-771
  • 査読あり
• [雑誌論文] 腹腔鏡下子宮筋腫核出術の安全性を担保するための最適な筋腫個数に関する検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 森嶋かほる, 原口 広史, 高村 将司, 金谷 真由子, 平野 茉来, 秋山 育美, 能瀬 さやか, 原田 美由紀, 平田 哲也, 廣田 泰, 甲賀 かをり, 平池 修, 大須賀穣, 藤井知行
  • 雑誌名: 臨床婦人科産科 巻: 73 ページ: 701-704
  • 査読あり
• [雑誌論文] 腹腔鏡手術術後ドレーン抜去時に発生した卵管ポートサイトヘルニアの一例 (2019)
  • 著者名/発表者名: 松尾光徳, 高村将司, 長嶋菜月, 原口広史, 原田美由紀, 甲賀かをり, 藤井知行, 大須賀穣
  • 雑誌名: 日本産科婦人科内視鏡学会雑誌 巻: 35 ページ: 299-303
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mdm2-p53-SF1 pathway in ovarian granulosa cells directs ovulation and fertilization by conditioning oocyte quality. (2019)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi H, Hirota Y, Saito-Fujita T, Tanaka T, Shimizu-Hirota R, Harada M, Akaeda S, Hiraoka T, Matsuo M, Matsumoto L, Hirata T, Koga K, Wada-Hiraike O, Fujii T, Osuga Y.
  • 雑誌名: FASEB J 巻: 33 ページ: 2610-2620
  • DOI: 10.1096/fj.201801401R
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Reports of the 2019 ACOG Annual Clinical and Scientific Meeting in Nashville, Tennessee (2019)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi H, Imamura Y, Kokabu T, Hasegawa-Minato J, Kobayashi M, Nagayasu Y, Sekine M, Yanaihara N.
  • 雑誌名: J Obstet Gynaecol Res 巻: 46 ページ: 5-8
  • DOI: 10.1111/jog.14127
  • オープンアクセス