| 研究課題/領域番号 |
19K18679
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| 研究機関 | 埼玉医科大学 |
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研究代表者 |
田丸 俊輔 埼玉医科大学, 医学部, 准教授 (10647077)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | ミトコンドリア / ダイナミクス / 脱落膜化 / 脂肪酸 / β酸化 |
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| 研究実績の概要 |
研究参加に同意した対象例の手術により得られた子宮検体から、子宮内膜間質細胞を分離・培養した。培養した子宮内膜間質細胞に脱落膜化刺激を行い、脱落膜化分化をさせた細胞（脱落膜化群）と、脱落膜化していない細胞（コントロール群）を作成し、各実験系で両群間の相違を比較検討した。
RI標識したパルミチン酸を指標としてミトコンドリアの脂肪酸β酸化活性を評価し、脱落膜化群で脂肪酸β酸化活性が上昇することを確認した。一方で、脂肪酸β酸化の基質であるアシルCoAの、ミトコンドリアへの取り込みを制御するCPT1の発現は低下することを確認した。
蛍光・電子顕微鏡による細胞形態の観察を行い、脱落膜化群でミトコンドリア数の増加と、細胞質の脂肪滴増加を確認した。また、細胞内ミトコンドリアの分裂に必要なDrp1について、免疫染色にてタンパク量発現の評価を行い、脱落膜化群ではDrp1の発現が増強することを確認した。また、ミトコンドリア分裂に関与する遺伝子群に関してRT-qPCR法による発現量の評価を行った。その結果、ミトコンドリアの分裂に重要なDRP1、DRP1と協調して働くMiD51、Mffの発現が脱落膜化群で上昇し、MiD49は発現が低下することがわかった。一方で、DRP1の分解に重要な役割を果たすMITOLの発現は不変であった。
さらに、脂肪酸β酸化を調節する遺伝子群についてRT-qPCR法による発現量の評価を行い、脱落膜化群ではACADMの発現が低下し、ACSM5の発現は上昇することを確認した。
上記の研究成果について、現在論文投稿の準備を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究実施に遅れが生じていたため研究期間の延長を行ったが、現在研究成果の論文投稿準備を進めることができており、研究期間内に成果を発表できるように努めてまいりたい。
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| 今後の研究の推進方策 |
進捗状況の欄に記載をしたが、2024年度が最終年度であるため、研究期間内に論文として研究成果を発表できるようにプロジェクトを進めていく所存である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
2023年度に論文作成まで完了する予定であったが、エフォート不足のため遅れを生じた。したがって、2024年度は研究の最終年度として、本研究に対するエフォートを高める予定であり、特に論文作成に関する費用の支出が必要となる見込みである。
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