CD8陽性Tfh細胞が関わる慢性炎症性疾患の病態メカニズムの解明

2021 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19K18776
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 村山 公介 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (20825418)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 慢性炎症性疾患 / IgG4関連疾患 / IgG4関連涙腺・唾液腺炎 / Tfh細胞 / CD8陽性Tfh細胞

研究実績の概要

本研究の目的は、IgG4関連涙腺唾液腺炎(IgG4-DS)の顎下腺病変部に存在しているCD8陽性濾胞ヘルパーT細胞(CD8+Tfh)の機能を解析し、同疾患におけるCD8+Tfhの役割を明らかにすることであり、最終的に同疾患の病態解明と新規治療法の開発を目指している。現時点での研究実績は以下の通りである。①IgG4-DS患者の顎下腺組織からTfh細胞を抽出し遺伝子発現を解析した結果、IgG4-DS患者のTfhで細胞傷害性T細胞(CTL)関連分子が高発現していることを発見し、PCRおよびフローサイトメトリーでCD8+Tfhの存在を確認した。②CD8+TfhはIgG4-DS患者の顎下腺組織の他、小児扁桃にも高率に存在していることを発見し、扁桃のCD8+TfhもIgG4-DS患者のCD8+Tfhと同様にCTL関連分子を高発現していることを確認した。③扁桃のCD8+TfhとCD8陰性Tfh細胞(CD8-Tfh)をB細胞と共培養し、培養上清中のIgGをELISA法で定量したところ、CD8-Tfhと比較してCD8+TfhとB細胞の共培養上清でIgGの減少を認めた。また同様にグランザイムB(GZMB)を定量したところ、CD8+Tfh単独培養した上清と比較して、B細胞との共培養上清でGZMBが減少していることを確認した。さらに共培養するB細胞をナイーブB細胞とメモリーB細胞に変更し同様の実験を行ったところ、IgG減少とGZMB減少はメモリーB細胞との共培養でより顕著であることを確認した。④活性化したCD8-TfhをIL-2とIL-7で刺激し培養を行うとCD8+Tfhが一部出現することをin vitroで確認した。
昨年よりこれらの所見をより確かにする追加実験を行い、現在これらすべてのデータをまとめて論文投稿の準備をすすめている。

研究成果

• [雑誌論文] Cytotoxic Tph-like cells are involved in persistent tissue damage in IgG4-related disease (2021)
  • 著者名/発表者名: Yabe H, Kamekura R, Yamamoto M, Murayama K, Kamiya S, Ikegami I, Shigehara K, Takaki H, Chiba H, Takahashi H, Takano K, Takahashi H, Ichimiya S.
  • 雑誌名: Modern Rheumatology 巻: 1 ページ: 249-260
  • DOI: 10.1080/14397595.2020.1719576
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] IgG4関連涙腺・唾液腺炎におけるCD8陽性濾胞ヘルパーT細胞の機能解析 (2021)
  • 著者名/発表者名: 村山公介、亀倉隆太、一宮慎吾、高野賢一
  • 学会等名: 第34回日本口腔・咽頭科学会
• [学会発表] 細胞傷害性Tph細胞のオリゴクローナルな増殖がIgG4関連疾患の病態形成に関与する (2021)
  • 著者名/発表者名: 亀倉隆太、村山公介、山本圭佑、重原克則、高野賢一、一宮慎吾
  • 学会等名: 第70回日本アレルギー学会
• [学会発表] IgG4関連疾患の病態形成におけるTph細胞の機能的役割 (2021)
  • 著者名/発表者名: 亀倉隆太、村山公介、一宮慎吾、高野賢一
  • 学会等名: 第1回日本耳鼻咽喉科免疫アレルギー感染症学会