| 研究課題/領域番号 |
19K18938
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| 研究機関 | 久留米大学 |
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研究代表者 |
井野 康 久留米大学, 医学部, 講師 (30352181)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 黄色ブドウ球菌 / 局所陰圧閉鎖療法 / 創内持続陰圧洗浄療法 / 細菌数 / バイオフィルム |
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| 研究実績の概要 |
ラット感染潰瘍モデルでの局所陰圧閉鎖療法と「創内持続陰圧洗浄療法」の解析と評価 (2020年度)
局所陰圧閉鎖療法は陰圧のみを創部にかける。一方、「創内持続陰圧洗浄療法」は生理食塩水を用いて潰瘍面を持続的に洗浄する。流速は3~10 ml/h、吸引圧は- 50cm H2Oで行う。開始後1，3， 5，7日目での組織像を、後述の 1)から4)で比較して評価する。1) 皮膚欠損創の大きさ;長径とそれと直行する短径をスケールで計測する。2) 肉芽組織内の細胞種(線維芽細胞、血管内皮細胞およびマクロファージ等の炎症細胞) の構成比や形態および定量解析;免疫化学染色法を用いるが、HSP47で線維芽細胞を、Iba-1 でマクロファージを、血管内皮細胞をCD31で染めて1視野内の細胞数を数える。3) 肉芽組織のコラーゲン定量;肉芽形成期の早期にはコラーゲンIII型が増加し、その後創傷治癒過程が進むとコラーゲンIII型はI型に置換される。免疫染色で経時的変化をコラーゲン I,III型各々染色して観察する。4) 肉芽組織内の細菌数の定量;潰瘍面を綿棒で拭い、細菌数測定装置(細菌カウンタ)で細 菌濃度(cfu/ml)を測定する。感染創の出来が悪い時は菌体濃度を上げる。という予定であった。ラットの背部に黄色ブドウ球菌の感染性皮膚潰瘍モデルを作成することは可能となった。また、その感染性潰瘍に対して、局所陰圧閉鎖療法を行ったり、創内持続陰圧洗浄療法を行ったりすることも出来たが、後者は1日程度の継続が妥当であるとわかった。また潰瘍面からスワブ法による細菌数の定量方法も検査機器の可能な値で測定できた。１）に関しては確認できたが、２）から４）に関してはまだ安定した結果を得ていない。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ラット背部での感染性潰瘍モデル作成と各治療法の実施は概ねできた。感染性皮膚潰瘍の成立にバイオフィルムの形成が大きく関わっているとする論文が多く見られる。このため、単に細菌数だけでなくバイオフィルムの形成とその除去が今回の実験で明らかにできるかも検討する。
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| 今後の研究の推進方策 |
感染性潰瘍モデル作成と同時にバイオフィルムの形成も見られるモデルを作成し、各治療を実施して細菌数や組織定量を行う。その後にペプチド併用してどのような効果が得られるかを明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
ラットを用いた感染性皮膚潰瘍モデルでの実験を継続し、ペプチドを用いた２０２１年度の研究も始めるため費用が必要である。
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