| 研究課題/領域番号 |
19K19050
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
坂口 晃平 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (70801455)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 低酸素 / 細胞外小胞 / エクソソーム / 骨再生 / 間葉系幹細胞 |
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| 研究実績の概要 |
1％酸素濃度の低酸素条件で培養回収した間葉系幹細胞由来のエクソソームをラット頭蓋骨欠損モデル(直径5mm)に投与したところ、micro-CTで欠損部における新生骨形成率が21％酸素濃度の条件で培養回収したエクソソームと比べて高く、組織学的に欠損部に早期の新生骨形成が観察された。2％酸素濃度や5％酸素濃度で培養回収したエクソソームでは、1%酸素濃度で回収したエクソソームと比べ新生骨形成率が低かった。また、in vitroにおいても、1%酸素濃度エクソソームと比べ2％おとび5％、21％酸素濃度エクソソームは、幹細胞の増殖能や遊走能が低いことがあきらかとなった。
1％酸素濃度の低酸素条件で培養した間葉系幹細胞から分泌されたエクソソームおよび21％酸素濃度で培養回収した際のエクソソーム、それぞれからRNAを回収した後、マイクロアレイを行いmiRNA発現プロファイリングを行い、発現率が3倍以上のmiRNAを選定した。そのインヒビターを作成してin vitroで幹細胞に投与して細胞動態に与える影響の評価をすすめている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
新型コロナウイルス感染症の感染拡大にともない、物品の納入が遅れたり、研究業務が中断となったりとやや遅滞が生じた。低酸素環境によって培養された間葉系幹細胞が分泌するエクソソームは、通常条件で回収されたエクソソームと比較した核酸プロファイリング、クラスター解析で違いがあることが明らかとなった。インヒビターを使用してエクソソーム内のmiRNAの機能解析をすすめていく。
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| 今後の研究の推進方策 |
エクソソームに含まれるmiRNAの機能解析を継続する。miRNAインヒビターを用いてmiRNAの機能を抑制して、骨形成関連遺伝子の発現、細胞の増殖能や遊走能、生存率、分化能などの変化に関して調べる。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
新型コロナウイルス感染症による流通の麻痺、遅滞から、予定していた消耗品の購入が一部困難であった。次年度に購入を行い、in vitroの実験において使用して結果を蓄積していく予定である。
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