| 研究課題/領域番号 |
17H06957
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究機関 | 佐賀大学 |
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研究代表者 |
増岡 美穂 佐賀大学, 医学部, 客員研究員 (70588699)
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| 研究期間 (年度) |
2017-08-25 – 2020-03-31
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| キーワード | 皮膚悪性腫瘍 / 悪性化 / ペリオスチン |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、細胞外マトリックスタンパク質であるペリオスチンを基盤とした皮膚悪性腫瘍における発症と悪性化の機序の解明、ペリオスチンがバイオマーカー、さらには創薬の標的となりうるか検討することを目指す。前年度に行った解析において、皮膚組織の免疫染色の結果より、ペリオスチンは悪性度を反映したバイオマーカーであり、EMT(上皮間葉転移)に関与している可能性を考える。
1，ペリオスチンによる皮膚悪性腫瘍の発症と悪性化機序の解明
(1)皮膚悪性腫瘍におけるペリオスチンの作用の解析および協調的に作用する因子の同定：3次元細胞培養法の解析を進め、皮膚悪性腫瘍において関与することが知られているTNF-αやTGF-βなどのサイトカインを加え、培養液中に産生されたサイトカイン、ケモカインを解析した。やや上昇傾向にあるサイトカイン、ケモカインもあったが、有意差がないため、Nを増やして再度行う予定である。また、腫瘍細胞の増殖はやや促進したが、形体や浸潤、分化には変化がみられなかった。
(2)皮膚悪性腫瘍デルマウスのペリオスチン欠損マウスへの適用と解析：皮膚悪性腫瘍におけるペリオスチンの生理的役割を解析するために、マウスの足底に皮膚悪性腫瘍細胞（血管肉腫や基底細胞癌のcell line）を注射し、病変部のペリオスチンの発現を解析する。これについては、現在、条件設定として注射する腫瘍細胞数を検討中である。
2，ペリオスチンを標的とした皮膚悪性腫瘍に対する治療薬の検討
抗ペリオスチン抗体の皮膚悪性腫瘍モデルマウスに対する効果の解析：1-(2)で皮膚悪性腫瘍モデルマウスが確立していないため、未だ行えていない状況である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
皮膚悪性腫瘍患者検体における解析については、おおむね順調に進んでおり、皮膚組織の免疫染色の結果は、予想通りにペリオスチンの沈着の程度は悪性度を反映した結果となっている。一方、3次元細胞培養法の解析は、野生型またはペリオスチン欠損マウスの線維芽細胞とcell lineの共培養を行ったが、マウスのプライマリーケラチノサイトと線維芽細胞を用いた実験ほど表皮の構築がみられず、条件設定を何度も検討した。それにより、分泌されるサイトカインやケモカインに上昇傾向がみられたが、明らかな有意差がないため、Nを増やして再度行う予定である。また、妊娠、出産に伴い、動物実験が予定通りに進まなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
1，ペリオスチンによる皮膚悪性腫瘍の発症と悪性化機序の解明
(1)皮膚悪性腫瘍におけるペリオスチンの作用の解析および協調的に作用する因子の同定：3次元細胞培養法の解析を進め、皮膚悪性腫瘍において関与することが知られているTNF-αやTGF-βなどのサイトカインを加え、培養液中に産生されたサイトカイン、ケモカインはやや上昇傾向であった。しかし、有意差がないため、Nを増やして再度行う予定である。
(2)皮膚悪性腫瘍デルマウスのペリオスチン欠損マウスへの適用と解析：皮膚悪性腫瘍におけるペリオスチンの生理的役割を解析するために、マウスの足底に皮膚悪性腫瘍細胞（血管肉腫や基底細胞癌のcell line）を注射し、病変部のペリオスチンの発現を解析する。これについては、条件設定として注射する腫瘍細胞数を検討し、ペリオスチンの発現を解析し、野生型とペリオスチン欠損マウスを用いて注射部位の腫瘍巣の増殖や局所浸潤度、またリンパ節や他臓器への転移を解析する。
2，ペリオスチンを標的とした皮膚悪性腫瘍に対する治療薬の検討
抗ペリオスチン抗体の皮膚悪性腫瘍モデルマウスに対する効果の解析：1-(2)で皮膚悪性腫瘍モデルマウスができて、有意差がみられれば、抗ペリオスチン抗体を皮下投与し、腫瘍巣の増殖や局所浸潤度、またリンパ節や他臓器への転移などで、症状の改善を評価する。これにより、ペリオスチンが皮膚悪性腫瘍の創薬の標的となりうるか検討する。
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