| 研究課題/領域番号 |
19K22354
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| 研究機関 | 帯広畜産大学 |
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研究代表者 |
玄 学南 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (10292096)
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| 研究分担者 |
正谷 達謄 鹿児島大学, 農水産獣医学域獣医学系, 准教授 (70614072)
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| 研究期間 (年度) |
2019-06-28 – 2022-03-31
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| キーワード | トキソプラズマ / タキゾイト / ブラディゾイト / ステージ変換 / 抗ウイルス / 自然免疫 |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、培養細胞や実験動物を用いた原虫-ウイルス共感染実験によって、トキソプラズマ潜伏感染がウイルスの増殖や病原性に及ぼす影響を明らかにすることを目的とする。当該年度に得られた成果は下記の通りである。
１）ノックアウト細胞を作出する目的でヒト初代線維芽細胞HFFにCRISPR/Cas9プラスミド導入を試みたところ、従来のトランスフェクション試薬では思うように遺伝子導入が見られなかった。現在、Nucleofector機器を導入したため、これを用いて遺伝子導入効率向上を検討するとともにプラスミドを用いない導入方法（Cas9蛋白質とガイドRNAの直接導入など）を試している。また、ゲノム編集にを活用しIFN受容体ノックアウトマウスの作出を開始しており、今後、IFN受容体ノックアウトマウスでも抗ウイルス応答が誘導されるかどうか検討していく。
２）マウスにトキソプラズマを感染させ、30日飼育することで潜伏感染マウスモデルを作出した。正常なマウスと潜伏感染マウスに、日本脳炎ウイルスと単純ヘルペスウイルスを脳内接種することで攻撃したところ、正常マウスにとって致死量のウイルス接種に対し、潜伏感染マウスは半数以上が生残した。すなわち、トキソプラズマ潜伏感染によって誘導された抗ウイルス自然免疫応答が、生体においてもウイルス感染に対する防御機能をもつことが示唆された。今後、感染マウス脳の免疫病理学的を解析実施する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の計画通りに進展し、所期の成果が得られたため。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、インターフェロン受容体ノックアウトマウスを用いて、抗ウイルス免疫誘導のメカニズム解析を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初予定していた一部の実験の未実施および研究打合せのための旅費の未使用のため。
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