| 研究課題/領域番号 |
19K22367
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| 研究機関 | 神戸大学 |
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研究代表者 |
万年 英之 神戸大学, 農学研究科, 教授 (20263395)
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| 研究分担者 |
笹崎 晋史 神戸大学, 農学研究科, 准教授 (50457115)
米澤 隆弘 東京農業大学, 農学部, 准教授 (90508566)
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| 研究期間 (年度) |
2019-06-28 – 2022-03-31
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| キーワード | ヤギ / ミトコンドリアDNA / Y染色体由来マーカー / 高密度SNPアレイ / 遺伝的多様性 / 環境適応形質遺伝子 / 伝播 / 起源 |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、世界規模で収集されたヤギのDNA試料に対し、全ゲノム解析を用いた大規模DNA情報解析を利用した起源・伝播経路の解明と環境適応形質遺伝子の全貌解明を着想し、その足掛かりとなる包括的研究を実施することを目的とする。
現在ヤギではSNPを検出するツールとして高密度SNPアレイ（GoatSNP50 chip）が開発されている。本年度はこのSNPアレイを用い、アジア10ヵ国11集団（中央アジア：カザフスタン、モンゴル / 東南アジア：フィリピン、ミャンマー、ラオス、ベトナム、カンボジア平地、カンボジア山地 / 南アジア：バングラデシュ、ブータン、ネパール）の在来ヤギサンプル240個体に適用した。その結果、223個体において良好な遺伝子型判定が行われ、この223個体を用いた解析を実施した。遺伝的多様性指数の結果として、算出されたヘテロ接合度(He)は0.2656（カンボジア山地）～0.4067（カザフスタン）、Hoは0.1869（カンボジア山地）～0.4044（カザフスタン）の範囲で確認された。カンボジア山地とフィリピンでは低い値が確認され、これは交通路が乏しいことによる地理的隔離によって最初に移入してきた母数が少なかったという創始者効果の影響が考えられた。次に、Heと家畜化中心地からの距離に対する相関を検討したところ、有意な負の相関が確認された。この結果は、家畜化中心地と言われている肥沃な三角州地帯がヤギの主要な家畜化中心地であることを示唆していた。また、集団の遺伝的構造解析であるAMOVA解析を行ったところ、among populationが9.74％、within populationが90.26％となり、本集団は集団間の分化の程度が低く、分析の対象となった大部分の変異が個体間の差にあるということが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究では、世界規模で収集されたヤギのDNA試料に対し、全ゲノム解析を用いた大規模DNA情報解析を利用した起源・伝播経路の解明を目的の一つとしている。
2019年度は、予定していたアジア10ヵ国11集団の在来ヤギサンプル240個体に対し、高密度SNPアレイを適用した。その結果、1) 240頭のうち、223個体において良好な遺伝子型判定が得られ、基礎となる大規模DNA情報の収集に成功した。2) 遺伝的多様性指数であるヘテロ接合度(He)を各国ごとに算出し、各国の遺伝的多様性の比較に成功した。3) またそれらの結果から、遺伝的多様性の違いに対する地理的背景などについて考察を行った。4) 遺伝的指数と家畜化中心地からの距離に対する相関解析により、ヤギの家畜化中心地を分子情報から再確認することに成功した。
大規模DNA情報の収集には遺伝子型判定エラーなどが付きまとうが、約93％の個体において目的とする十分なDNA情報を得ることができている。またそれらの大規模DNAデータを用いた解析に着手し、遺伝的多様性の比較とその理由についての考察に成功している。また、集団の遺伝的構造解析にも着手し、集団間の分化の程度や変異の由来についても考察が得られている。
これらの結果は、国際学会である37th International Society for Animal Genetics Conferenceにおいて2課題の発表を行っている。したがって、本年度の研究進捗状況としては概ね順調に進展していると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
2020年度は、得られた大規模DNAデータを用いた1) 系統解析（Neighbor-joining treeやNeighbor network）、遺伝構造解析（Admixture解析やSTRUCTURE解析）を予定している。
また2017-2019年度に実施した科学研究費(基盤研究(B)海外学術調査）の「フィリピン・インドネシア島嶼におけるマメヤギの遺伝学的調査研究」と「中央アジアにおけるウシ科，ラクダ科家畜とその近縁種の遺伝資源学的調査研究」において、フィリピン、インドネシア、キルギスなどのDNA賛否ウルが得られたため、これらのサンプルについても2019年度と同様、高密度SNPアレイを用いた解析を予定し、差プルを増加した解析についても着手する。
さらに、これらの高密度SNPアレイ解析に成功すれば、これらのサンプルに付随している形質データとのゲノムワイド相関解析が可能になると考えているので、「肉髭の有無」「角の有無」を対象形質として相関解析を手掛ける予定である。
加えて2019年度までの結果から、特にネパールの在来ヤギはかなり標高差が異なる場所で飼育されており（標高100m~4000m）、ヤギの様々な環境適応形質の責任遺伝子を検討するには適当な対象であると考えている。したがって、高地適応に関する遺伝子多型に対する解析を実施する予定である。現在のところ、EPAS1遺伝子, DSG3遺伝子, KITLG遺伝子, FGF5遺伝子などの遺伝しない多型に着目し、飼育箇所の標高差との相関、関連、頻度分布解析などを実施する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
申請時当初の予定では、ヤギ高密度SNPアレイの購入に対して2,280千円の予定であった。しかし、課題受理の前に他の予算で調達が可能となったために、その予算分が黒字となった。逆に年度内に高速冷却遠心機が破損したために購入した。この高速遠心機は、その他研究でも使用するために合算購入とし、417千円を使用した。また当時予定しなかったサンプル保存のためのフリーザーが必要となり購入した。その費用が、318千円である。この差額がおおむね次年度使用額が生じた理由である。使用計画としては、解析の結果により、追加のヤギ高密度ＳＮＰアレイが必要になる可能性が出てきており、この費用として計上したい。
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