2020 年度研究成果報告書

『細胞分裂依存バーコードによる細胞分裂数計測・全系統樹トレーシング』技術の開発

研究課題

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研究課題/領域番号	19K22380
研究種目	挑戦的研究(萌芽)
配分区分	基金
審査区分	中区分43:分子レベルから細胞レベルの生物学およびその関連分野
研究機関	東京大学
研究代表者	田中洋介東京大学, 医科学研究所, 助教 (10509087)
研究期間 (年度)	2019-06-28 – 2021-03-31
キーワード	nCas9-CDA / TATAloxP
研究成果の概要	本研究では、細胞内連鎖反応システム（nCas9-CDAを用いた連続的sgRNA発現システム）を構築した。本システムでは、sgRNAのスキャフォールド領域あるいはTATAloxPの逆向き反復配列領域のT塩基からC塩基への置換をnCas9-CDAで修復することで、次のsgRNAの発現を誘導するシステムである。実際に、哺乳類細胞（293T細胞）において、sgRNAのスキャフォールド変異の修復を通してsgRNAの発現が連鎖するシステムを構築した。
自由記述の分野	細胞生物学
研究成果の学術的意義や社会的意義	今回の研究において、sgRNAの連鎖反応を哺乳類細胞で実現できた。本研究においては、この連鎖反応を細胞周期と連動した反応にできれば、細胞が何回分裂したかを計測可能になる。また、細胞内において制御できる連続反応を実現した本研究の技術は、様々な連続した現象・反応を細胞内で計測するような研究への応用が期待できる。本研究計画的には、マイルストーンの前半が終わったにすぎないが、本研究で実現できたsgRNAの連続反応は、前述したように様々な研究分野における新しい計測技術の基礎となるものであり、学術的意義は非常に大きい。