| 研究課題/領域番号 |
19K22384
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
成田 哲博 名古屋大学, 理学研究科, 准教授 (30360613)
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| 研究期間 (年度) |
2019-06-28 – 2021-03-31
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| キーワード | パルス電子顕微鏡 / タンパク質動態 / 液中観察 / 電子顕微鏡 |
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| 研究実績の概要 |
2019年度は、タンパク質溶液を電子顕微鏡で観察するためのホルダの開発を行った。まず、市販のホルダK-kitを用いて評価を行った。電子顕微鏡の溶液ホルダは窒化シリコンの膜の窓ではさんだ溶液を観察するのが基本コンセプトだが、K-kitは窓の厚さが両面合わせて200 nmもある。十分なコントラストが得られず、自分達でホルダを作成する方針をとった。窓厚40 nmの窒化シリコンの窓をもったグリッドをNTT advanced technologyにつくってもらい、これを貼り合わせることで溶液ホルダを作成した。貼り合わせ方を工夫することで、５割以上の成功率での作成に成功。溶液の厚さも抑えることができ、非常に高いコントラストで40 nmの金コロイドが、溶液中をブラウン運動で動き回る姿を直接観察できた。2020年度前半に溶液観察が可能な70kV以上の加速電圧を持った第二世代のパルス電子顕微鏡が立ち上がる予定であり、それまでにリポソームやアクチンバンドル、微小管などを観察する条件を、通常の電子顕微鏡の動画撮影を用いて検討する。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
溶液ホルダがほぼ完成、現在試料の封入の仕方を工夫しているところであり、おおむね予定通りの進捗である。
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| 今後の研究の推進方策 |
2020年度前半に立ち上がる第二世代パルス電子顕微鏡を用いて、実際にタンパク質動態の観察を始める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は、ホルダ作成が順調に進み予算が節約できた。パルス電子顕微鏡の立ち上げは2020年度になるため、立ち上げ後の実験をすばやくすすめるため、2020年度に人件費、消耗品を投入して、当初目的以上の成果を目指したい。
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