研究課題
インフルエンザウイルスのゲノムRNAは8分節に分かれている。各RNA分節はウイルス核タンパク質およびRNAポリメラーゼと結合し、リボ核酸タンパク質複合体（RNP複合体）として存在する。感染細胞で形成される子孫ウイルス粒子が増殖能を持つためには、8種類のRNA分節を全て取り込まなければならない。しかし何本のRNA分節がどのように子孫ウイルス粒子内に取り込まれるかという”ゲノムパッケージング機構”は、ウイルス学の古典的命題として半世紀以上も謎のままだった。申請者はこれまでに、8種類のRNP複合体が規則的な配置（「１＋７」構造）をとって取り込まれることを明らかにした。そこで本研究では、ウイルスゲノムRNAを介したRNP複合体間相互作用の立証とその分子基盤の解明を目指した。これまでに、in vitro RNA合成系を用いて8種類のvRNAおよび各vRNAの3'端および5'端のRNAを合成し、ゲルシフトアッセイを用いてvRNA-vRNA間相互作用の解析を実施した。その結果、in vitroにおいて、8種類のvRNAがそれぞれ複数のvRNAと相互作用しネットワークを形成していること、多くの相互作用がゲノムパッケージングシグナル間で認められることを明らかにした。さらに、in vivoにおいてパッケージングシグナル間の相互作用が存在するかどうかを解析した。HA分節のパッケージングシグナルに変異を導入したウイルスを作出し、減弱したゲノムパッケージング効率を回復させる変異を解析したところ、PB2分節のパッケージングシグナルに変異が導入されていることを見出した。リバースジェネティクスにより、HA分節およびPB2分節に当該変異を入れたウイルスを作出したところ、HA分節やPB2分節のパッケージング効率が変動することを確認した。すなわち、NPやポリメラーゼが結合したvRNPの状態において、HA分節とPB2分節の間にパッケージングシグナルを介した相互作用が存在することを示した。
すべて 2022 2021
すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 2件)
J Virol
巻: 96 ページ: e0164121
10.1128/JVI.01641-21
mBio
巻: 13 ページ: e03315-21
10.1128/mbio.03315-21
Commun Biol
巻: 4 ページ: 858
10.1038/s42003-021-02388-4.
