| 研究課題/領域番号 |
19K22755
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| 研究機関 | 山梨大学 |
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研究代表者 |
猩々 英紀 山梨大学, 大学院総合研究部, 准教授 (60284626)
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| 研究分担者 |
林 敬人 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (40512497)
葛西 宏威 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (20324189)
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| 研究期間 (年度) |
2019-06-28 – 2023-03-31
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| キーワード | 脳の生活反応 / 中枢神経系リンパ管 / 脳内免疫細胞 |
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| 研究実績の概要 |
生活反応（出血や細胞反応などの生体反応）は損傷が生前に生成したことを示す重要な証拠である。また、免疫システムを介した生活反応の証明は、損傷機転や受傷後経過時間の解析に利用されている。ところが、中枢神経系は免疫特権領域であり、これまで正常な脳では免疫細胞の出入りはないと考えられていたために、免疫システムを利用した脳の生活反応の解析は殆ど実施されてこなかった。しかしながら近年、マウスの硬膜静脈洞の内表面にリンパ管が発見され、正常な状態でも免疫細胞が脳とリンパ管を移動している可能性が示唆されている。即ち、これまで見過ごされてきた免疫システムを介した生活反応のマーカーを見出すことができるかもしれない。そこで本研究では、ヒトの中枢神経系にもリンパ管が存在することを分子組織化学的に証明し、脳脊髄液を介して移動する免疫細胞を特定すると共に、脳の炎症や消炎などに関わる免疫細胞基盤を明らかにし、新たな生活反応のマーカーを創出する事を目指している。
当該年度も新型コロナウイルス感染症の影響により、試料採取が困難であった。そこで、昨年度に引き続き固定組織標本を中心に解析を実施した。免疫組織化学的手法を用いて固定組織標本から脳内免疫細胞を解析するために新規方法の開発を試みた。現在も脳実質へ移動する免疫細胞を鋭意解析中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
当該年度に脳実質からの免疫細胞調製法の改善点を検証し、FACS解析によってリンパ管を介して脳実質へ移動する免疫細胞を特定する計画であった。しかしながら、新型コロナウイルス感染症の影響により試料収集に遅延が生じ、免疫細胞調製法の改善・検証およびFACS解析を実施することが出来なかった。そこで、固定組織標本を用いて新たな脳内免疫細胞解析法の開発を実施しているが、最終的には未固定試料での解析が必要なことから、現在の進捗状況は遅れているとした。
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| 今後の研究の推進方策 |
継続して、ヒトの中枢神経系にもリンパ管が存在することを証明すると共に、リンパ管を介して脳実質へ移動する免疫細胞を特定する予定である。新型コロナウイルス感染症の影響を鑑み、固定組織標本を中心に研究を推進する。即ち、固定組織標本を用いて分子組織化学的にリンパ管の存在を証明および脳内免疫細胞の解析を実施する。さらに、コロナ禍が収束し次第、新たに脳試料を採取し、FACS解析を実施してリンパ管を介して脳実質へ移動する免疫細胞を特定する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
新型コロナウイルス感染症の影響により、研究計画の一部変更・遅延が生じたため。次年度研究計画に基づいて、実験に必要な消耗品等として使用予定である。
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