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2020 年度 実績報告書

りん光性分子と発光寿命顕微鏡を用いた生体組織内の酸素濃度マッピング法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 19K22947
研究機関群馬大学

研究代表者

吉原 利忠  群馬大学, 大学院理工学府, 准教授 (10375561)

研究期間 (年度) 2019-06-28 – 2021-03-31
キーワードりん光 / りん光寿命 / イリジウム錯体 / 酸素 / 細胞 / 組織
研究実績の概要

本研究の目的は,(1)生きた小動物組織内の酸素濃度(分圧)分布をイメージングするために,酸素濃度に依存して発光が顕著に変化する‘りん光’を利用した酸素検知試薬(りん光プローブ)を,イリジウム錯体(Ir錯体)を用いて開発すること,(2)開発したIr錯体と共焦点りん光寿命イメージング顕微鏡(PLIM)を用いて,組織内(肝臓,腎臓,腫瘍など)の酸素濃度(分圧)を単一細胞レベルの分解能でリアルタイムイメージングすることである。
令和2年度は,前年度に開発した培養細胞、組織切片、生きた小動物臓器を観察できるりん光寿命イメージング顕微鏡と、赤色りん光イリジウム錯体を用いて、マウス臓器肝臓の酸素分圧の定量的イメージングを実施した。麻酔下にあるマウスの尾静脈より、イリジウム錯体を100~200 nmol投与して30分後に腹部を開腹して、肝臓に分布するイリジウム錯体のりん光寿命を計測した。得られたりん光寿命を酸素分圧に変換するために、肝実質細胞を平面培養し必要なパラメータを取得した。これらを用いて、肝臓の酸素分圧を算出したところ、門脈辺縁領域では約40 mmHg、中心静脈付近では約25 mmHg、それらの中間領域では約32 mmHgであった。これは針電極を用いて得られた値とほぼ一致しており、世界で初めて、光学的手法で肝臓の酸素分圧を定量的にイメージングすることに成功した。また、針電極では、各場所を‘点’でしか計測できないのに対して、本手法では、‘面’で計測できるため一度に多くの空間的情報を取得できる。さらに、同一個体を用いて、同じ場所の酸素分圧を数時間にわかって追跡できるため、個体の代謝過程を、単一細胞レベルで観測することもできる。

  • 研究成果

    (16件)

すべて 2021 2020 その他

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (3件) 図書 (3件) 備考 (1件) 産業財産権 (2件) (うち外国 1件)

  • [雑誌論文] Phosphorescent Ir(III) complexes conjugated with oligoarginine peptides serve as optical probes for in vivo microvascular imaging2021

    • 著者名/発表者名
      Yasukagawa Mami、Shimada Aya、Shiozaki Shuichi、Tobita Seiji、Yoshihara Toshitada
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 11 ページ: 4733

    • DOI

      10.1038/s41598-021-84115-x

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Membrane properties of amacrocyclic tetraether bisphosphatidylcholine lipid: Effect of a single membrane-spanning polymethylene cross-linkage between two head groups of ditetradecylphosphatidylcholine membrane2021

    • 著者名/発表者名
      Tsuchida Naoyuki、Takagi Toshiyuki、Takahashi Hiroshi、Yoshihara Toshitada、Tobita Seiji、Sonoyama Masashi
    • 雑誌名

      Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes

      巻: 1863 ページ: 183569

    • DOI

      10.1016/j.bbamem.2021.183569

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Analysis of the triplet-state kinetics of a photosensitizer for photoimmunotherapy by fluorescence correlation spectroscopy2021

    • 著者名/発表者名
      Takakura Hideo、Goto Yuto、Kitamura Akira、Yoshihara Toshitada、Tobita Seiji、Kinjo Masataka、Ogawa Mikako
    • 雑誌名

      Journal of Photochemistry and Photobiology A: Chemistry

      巻: 408 ページ: 113094

    • DOI

      10.1016/j.jphotochem.2020.113094

    • 査読あり
  • [雑誌論文] In vivo O2 imaging in hepatic tissues by phosphorescence lifetime imaging microscopy using Ir(III) complexes as intracellular probes2020

    • 著者名/発表者名
      Mizukami Kiichi、Katano Ayaka、Shiozaki Shuichi、Yoshihara Toshitada、Goda Nobuhito、Tobita Seiji
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 10 ページ: 21053

    • DOI

      10.1038/s41598-020-76878-6

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] A distinctive distribution of hypoxia‐inducible factor‐1α in cultured renal tubular cells with hypoperfusion simulated by coverslip placement2020

    • 著者名/発表者名
      Honda Tomoko、Hirakawa Yosuke、Mizukami Kiichi、Yoshihara Toshitada、Tanaka Tetsuhiro、Tobita Seiji、Nangaku Masaomi
    • 雑誌名

      Physiological Reports

      巻: 9 ページ: e14689

    • DOI

      10.14814/phy2.14689

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Design of spontaneously blinking fluorophores for live-cell super-resolution imaging based on quantum-chemical calculations2020

    • 著者名/発表者名
      Tachibana Ryo、Kamiya Mako、Morozumi Akihiko、Miyazaki Yoshiyuki、Fujioka Hiroyoshi、Nanjo Aika、Kojima Ryosuke、Komatsu Toru、Ueno Tasuku、Hanaoka Kenjiro、Yoshihara Toshitada、Tobita Seiji、Urano Yasuteru
    • 雑誌名

      Chemical Communications

      巻: 56 ページ: 13173~13176

    • DOI

      10.1039/D0CC05126H

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Spontaneously Blinking Fluorophores Based on Nucleophilic Addition/Dissociation of Intracellular Glutathione for Live-Cell Super-resolution Imaging2020

    • 著者名/発表者名
      Morozumi Akihiko、Kamiya Mako、Uno Shin-nosuke、Umezawa Keitaro、Kojima Ryosuke、Yoshihara Toshitada、Tobita Seiji、Urano Yasuteru
    • 雑誌名

      Journal of the American Chemical Society

      巻: 142 ページ: 9625~9633

    • DOI

      10.1021/jacs.0c00451

    • 査読あり
  • [学会発表] クマリン類を配位子に有するイリジウム錯体を用いた生体内酸素レベル計測2021

    • 著者名/発表者名
      吉原 利忠・広瀬 達也・塩崎 秀一・飛田 成史
    • 学会等名
      第42回日本光医学・光生物学会
  • [学会発表] Visualization of hypoxia cells in tissues by using phosphorescence lifetime imaging microscopy2020

    • 著者名/発表者名
      Toshitada YOSHIHARA
    • 学会等名
      第58回日本生物物理学会年会
  • [学会発表] 蛍光寿命イメージング顕微分光法を用いた細胞および組織内脂質滴のライブイメージング2020

    • 著者名/発表者名
      吉原 利忠 ・ 丸山 凌 ・ 塩崎 秀一 ・ 飛田 成史
    • 学会等名
      2020年web光化学討論会
  • [図書] BIO INDUSTRY2021年3月号2021

    • 著者名/発表者名
      吉原利忠(分担執筆)
    • 総ページ数
      86
    • 出版者
      シーエムシー出版
  • [図書] 化学便覧 基礎編 改訂6版2021

    • 著者名/発表者名
      吉原利忠、飛田成史(分担執筆)
    • 総ページ数
      1534
    • 出版者
      丸善出版
    • ISBN
      9784621305218
  • [図書] 実験医学2020年6月号2020

    • 著者名/発表者名
      吉原利忠、飛田成史(分担執筆)
    • 総ページ数
      147
    • 出版者
      羊土社
    • ISBN
      978-4-7581-2532-1
  • [備考] 群馬大学理工学府分子科学部門 吉原研究室

    • URL

      https://tobita-lab.chem-bio.st.gunma-u.ac.jp/index.html

  • [産業財産権] 血管内皮イメージング試薬2020

    • 発明者名
      吉原利忠、安カ川真美、鷲見さくら、飛田成史
    • 権利者名
      吉原利忠、安カ川真美、鷲見さくら、飛田成史
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      特願2020-211560
  • [産業財産権] REAGENT FOR MEASURING OXYGEN CONCENTRATION IN CELL AND TISSUE2020

    • 発明者名
      吉原利忠、広瀬達也、飛田成史
    • 権利者名
      吉原利忠、広瀬達也、飛田成史
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      PCT/JP2020/032028
    • 外国

URL: 

公開日: 2021-12-27  

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