好中球エラスターゼを標的とした再発難治性急性白血病の病態解明と新規治療開発

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19K23912
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 川島 直実 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (80844844)
• 研究期間 (年度): 2019-08-30 – 2021-03-31
• キーワード: 急性骨髄性白血病 / CBF-AML / 好中球エラスターゼ / PRTN3

研究実績の概要

RUNX1-RUNX1T1-AML細胞株であるKasumi-1、SKNO-1を用い、好中球エラスターゼの一つであるPRTN3のshRNAを導入し同遺伝子をノックダウンした。PRTN3欠失細胞において細胞周期のG1停止を認め、有意にアポトーシス細胞が増加することを確認している72時間の時点において、両細胞株よりRNAを抽出しトランスクリプトーム解析を施行した。コントロール細胞と比べて、PRTN3欠失細胞ではRas蛋白シグナル伝達制御に関わる遺伝子群の有意な発現低下を認めた。さらにRT-PCRにより発現を解析し、PRTN3欠失Kasumi-1, SKNO-1両細胞株において有意にRHOG, LIMK1遺伝子の発現低下を認めた。Kasumi-1, SKNO-1両細胞株においてウェスタンブロットにより蛋白発現の変化を解析し、PRTN3欠失細胞においてMAPKリン酸化の抑制を認めた。これら結果から、PRTN3高発現がRHOG,LIMK1発現亢進を介してRasシグナル伝達亢進を起こし、MAPKリン酸化、細胞周期進行を引き起こす経路が示唆された。in vitroで証明されたPRTN3ノックダウンによる細胞株の生存抑制効果について、さらに、MLL-AF9導入マウス白血病モデルを用いてin vivoでの解析を行った。PRTN3をノックダウンしたMLL-AF9白血病細胞移植モデルは、コントロールと比較し、有意に生存期間の延長を認めた。

研究成果

• [雑誌論文] Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation at the first remission for younger adults with FLT3 ‐internal tandem duplication AML: The JALSG AML209‐FLT3‐SCT study (2020)
  • 著者名/発表者名: Kawashima N, Ishikawa Y, Atsuta Y, Sawa M, Ozawa Y, Hayashi M, Kohno A, Tomita A, Maeda T, Sakaida E, Usuki K, Hagihara M, Kanamori H, Matsuoka H, Kobayashi M, Asou N, Ohtake S, Matsumura I, Miyazaki Y, Naoe T, Kiyoi H
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 111 ページ: 2472～2481
  • DOI: 10.1111/cas.14448
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Day 0 bone marrow pathology of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation is a novel prognostic factor in myeloid malignancies (2020)
  • 著者名/発表者名: Sato Takahiko、Kawashima Naomi、Ito Masafumi、Atsuta Yoshiko、Kagaya Yusuke、Seto Aika、Morishita Takanobu 、Fukushima Nobuaki、Ozawa Yukiyasu、Miyamura Koichi
  • 雑誌名: BLOOD CELL THERAPY / The official journal of APBMT 巻: 3 ページ: 84-91
  • DOI: 10.31547/bct-2020-007
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Upregulation of adhesion molecules associates with PDX-specific clonal expansion and R/R AML (2020)
  • 著者名/発表者名: 川島直実、石川裕一、金貞姫、木原里香、西山誉大、後藤辰徳、森下喬允、中島麻梨絵、牛島洋子、池野世新、綿本浩一、北村邦朗、小澤幸泰、清井仁
  • 学会等名: 第82回日本血液学会学術集会