| 研究課題/領域番号 |
19K24096
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
吉田 和真 広島大学, 医系科学研究科(歯), 助教 (60846856)
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| 研究期間 (年度) |
2019-08-30 – 2022-03-31
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| キーワード | 炎症制御 / 硬組織 / 歯内療法 |
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| 研究実績の概要 |
本研究の目的は，ヘパリン・LL37 複合体が細胞機能調節能を有する歯内疾患治療薬のシーズ候補であるかを検討し，歯内疾患治療薬としての有用性を評価することである。
Cathelicidin family に属する抗菌ペプチド LL37 は，抗菌活性に加えて，リポ多糖 (LPS) 中和能および血管新生，骨形成作用といった細胞機能調節能を有するが，LL37 がもつ細胞障害性が臨床応用を困難にしている。申請者は，LL37 をヘパリンと複合させ，ヘパリン・LL37 複合体として作用させることによって，抗菌活性や LPS 中和能を保持しつつ，細胞障害性を低減できることを報告している。
in vitro 実験系でのヘパリン・LL37 複合体の作用について検討を行った。
ヘパリン・LL37 複合体で刺激した骨芽細胞様細胞をアリザリンレッドＳで染色したところ，対照群にくらべ骨結節の発達の傾向が見られたが，統計学的に有意な差は得られなかった。同様に，ALP染色を行った結果，ALP活性の亢進は見られなかった。mRNAレベルでは亢進が見られた骨分化に関して異なる方法で検討を行う必要がある。
ヘパリン・LL37 複合体の創傷治癒作用を検討するために，各種血管新生マーカーの検討を行った結果，VEGF発現の上昇が見られ，ヘパリン・LL37 複合体による血管新生マーカー遺伝子の発現促進が確認出来た。他の方法でも血管新生能を確認する必要がある。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
LL37 が歯髄細胞に対して持っているとされる細胞機能調節能がヘパリン・LL37複合体も有していることが判明し，ヘパリン・LL37 複合体の機能を一部解明することが出来た。今後，ヒト血管アッセイ等で細胞機能調整能を検討していく方針がたったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
引き続きヘパリン・LL37 複合体が歯内療法治療薬のシーズ候補であるか検討を行う。ヘパリン・LL37複合体の骨分化マーカー遺伝子の発現上昇の分子メカニズム解明について，LL37 との差異を明らかにする研究を実施する予定である。血管新生に関わるシグナリング経路であるとされるERK/NF-kB pathwayの検討を各種阻害剤を用いて行う。さらにマウスモデルを用いたin vivoモデルで検証を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度使用額が生じた理由としては、新型コロナウイルス感染症蔓延による実験環境の制約と，in vitro 実験が計画通りに行えなかったことが挙げられる。今年度使用しなかった予算を使用し，実験動物の購入等に充てる。
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