| 研究分担者 |
植村 知博 東京大学, 大学院・理学系研究科, 助教 (90415092)
佐藤 健 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 准教授 (00303602)
平田 龍吾 独立行政法人理化学研究所, 中野生体膜研究室, 先任研究員 (60260197)
齋藤 知恵子 独立行政法人理化学研究所, 中野生体膜研究室, 専任研究員 (10321762)
黒川 量雄 独立行政法人理化学研究所, 中野生体膜研究室, 専任研究員 (40333504)
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| 研究概要 |
1.膜交通の選別分子機構
(1)ゴルジ体槽成熟:酵母可視化積荷マーカーの観察系の改良を進めた。定重的解析のためのデータ処理を検討した。
(2)COPII小胞からのゴルジ槽形成:小胞体出芽部位と小胞体膜の形態との関係を詳細に解析した。シート状小胞体が過剰の状態で,出芽部位が集積し,その直下に異常な形態のゴルジ体が生じる現象を見出し,光顕と電顕で観察した。
(3)ポストゴルジネットワーク:ゴルジ体トランス領域からトランスゴルジ網への遷移をコートタンパク質成分の観点等から詳細に観察した。
(4)共焦点顕微鏡の改良開発:超高感度高速のシステムで,3色同時観察に必要な装置開発を進めた。
(5)FRETイメージング:酵母Ypt GTPase群の活性を可視化する1分子FRETプローブの作製に成功した。
2.生化学的再構成と1分子観察
(1)COPII小胞形成の完全再構成系:COPII小胞に積み込まれる積荷の分子数を定重し,濃縮と排除の機構を示唆した。
(2)人工膜での1分子観察:Sar1のGTPase活性が,積荷の選別で果たす役割を可視化することに成功した。
3.高等植物における膜交通の役割
(1)植物エンドサイトーシス:真核生物保存型と植物特異的Rab5が,異なる輸送経路を制御していることを明らかにした。また,エフェクター分子の相互作用ネットワークを解明した。
(2)植物のポストゴルジ膜交通:トランスゴルジ網のSNAREおよびRab11が,植物のさまざまなストレス応答に関与していることを示唆した。
(3)液胞形成と分化:可視化マーカーを確立し,液胞膜分化の意義についてさらに解析を進めた。
(4)細胞極性形成と維持:シロイヌナズナのミオシンVIIIおよびXI全分子種について,培養細胞およびシロイヌナズナ個体における局在解析を行った。また,積荷アダプターの同定を試みた。
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