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1. L3MBTの標的遺伝子の同定
L3MBTにGFPを付加したタンパク質を強制発現するHela細胞を作製し、抗GFP抗体を用いてChlP on chip解析を行うことにより、L3MBTが標的とする遺伝子部位の候補を得ることができた。その中の一部について、実際にES細胞やES細胞を分化させたEmbryoid Body (EB)細胞を用いてChIP-PCRを行うことにより、細胞の分化過程におけるL3MBTの結合を確認した。
2. L3MBT欠損が細胞分化に与える影響の解析
L3MBTの欠損が細胞分化に与える影響を解析するために、L3MBTノックアウトES細胞を作製した。それをEBへ分化させ、分化の際の遺伝子発現の変化等をコントロールES細胞と比較した。
3. L3MBTのコンディショナルノックアウトマウスを作製
ノックアウトターゲティングベクターの設計・構築を行い、ES細胞で相同組み換えを行った。相同組み換えを起こしたES細胞のクローンを数種得ることができた。
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