機能付加型の癌特異的複製型ヘルペスウイルスベクターの基礎開発

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20015013
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 藤堂 具紀 東京大学, 医学部・附属病院, 特任教授 (80272566)
• 研究分担者: 稲生 靖 東京大学, 医学部・附属病院, 特任准教授 (50372371) ; 福原 浩 東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (20292948)
• キーワード: 癌 / ウイルス / バイオテクノロジー / ゲノム / 遺伝子

研究概要

本研究は、ウイルスゲノムを遺伝子工学的に改変して癌細胞で選択的に複製する単純ヘルペスウイルス1型(HSV-1)ベクターに直接免疫刺激遺伝子などの外来遺伝子を挿入し、ウイルス複製に伴う直接的な殺細胞効果に加え特別な機能を有する次世代の癌特異的増幅型ベクターの基礎開発を目的とした。治療域の広い増殖型第三世代HSV-1のG47Δを基本骨格として用い、BACプラズミドと2つのrecombinase系を利用して、任意の外来遺伝子をHSV-1ゲノムに容易かつ的確に組み込むことができる独自の作製システムを活用した。本年度は、腫瘍特異性の高い抗腫瘍免疫惹起型のHSV-1開発を目的に、可溶型マウスB7-1を発現するHSV-1(T-mB7.1-Ig)を新たに作製し、HSV-1に感受性の高いA/Jマウスと、同系で低免疫原性のNeuro2a神経芽腫細胞を用いて評価を行った。T-mB7.1-Igは、in vitroでは対照ウイルスT-01と同等のウイルス複製能と殺細胞作用を呈したが、in vivo皮下腫瘍モデルにおいては、1x10^4pfuの低用量の腫瘍内投与でも、T-01に比べ有意に高い抗腫瘍効果を示した。更に、がん治療用HSV-1の体内動態を生体外から観察するためのツールとして、CMVプロモータ制御下にルシフェラーゼを発現するウイルスT-luc(CMV)を作製した。IVISを用いて観察すると新たな感染を検出できる。腫瘍内に直接投与するとNeuro2a皮下腫瘍では7日間、U87MG皮下腫瘍では14日以上のウイルス感染の持続が認められた。またU87MG皮下腫瘍を有するヌードマウスの尾静脈内投与では、肝臓への高い集積を認めるものの数日内に消失し、一方皮下腫瘍に届いたウイルスの感染が遷延することが観察された。これら機能付加型HSV-1を用い、ウイルス療法の治療効果向上と最適化を目指す。

研究成果

• [雑誌論文] Long-term control of disseminated pleomorphic xanthoastrocytoma with anaplastic features by means of stereotactic irradiation (2009)
  • 著者名/発表者名: Koga T, Morita A, Maruyama K, Tanaka M, Ino Y, Shibahara J, Louis DN, Reifenberger G, Itami J, Hara R, Saito N, Todo T
  • 雑誌名: Neuro Oncol ページ: Epub 2009 Jan 22
  • 査読あり
• [雑誌論文] The motor-evoked potential threshold evaluated'by tractography and electrical stimulation (2009)
  • 著者名/発表者名: Kamada K, Todo T, Ota T, Ino K, Masutani Y, Aoki S, Takeuchi F, Kawai K, Saito N
  • 雑誌名: J Neurosurg ページ: Epub 2009 Jan 23
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pilot study of anti-angiogenic vaccine using fixed whole endothelium in patients with progressive malignancy after failure of conventional therapy (2008)
  • 著者名/発表者名: Okaji Y, Tsuno NH, Tanaka M, Yoneyama S, Matsuhashi M, Kitayama J, Saito S, Nagura Y, Tsuchiya T, Yamada J, Tanaka J, Yoshikawa N, Nishikawa T, Shuno Y, Todo T, Saito N, Takahashi K, Nagawa H
  • 雑誌名: Eur J Cancer 44(3) ページ: 383-390
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oncolytic virus therapy using genetically engineered herpes simplex viruses (2008)
  • 著者名/発表者名: Todo T
  • 雑誌名: Frontiers in Bioscience 13 ページ: 2060-2064
  • 査読あり
• [雑誌論文] 機能MRI1MEGを用いた術前言語機能局在診断 (2008)
  • 著者名/発表者名: 鎌田恭輔、太田貴裕、川合謙介、藤堂具紀、川原信隆、森田明夫、斎藤延人
  • 雑誌名: 脳神経外科ジャーナル 17(1) ページ: 4-12
• [雑誌論文] 脳腫瘍のウイルス療法 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高橋雅道、藤堂具紀
  • 雑誌名: 分子細胞治療 7(2) ページ: 129-134
• [雑誌論文] 脳実質内脳腫瘍の化学治療-最近の薬物治療の動向- (2008)
  • 著者名/発表者名: 田中実、藤堂具紀
  • 雑誌名: 画像診断 28(4) ページ: 430-437
  • 査読あり
• [雑誌論文] "Armed" oncolytic herpes simplex viruses for brain tumor therapy (2008)
  • 著者名/発表者名: Todo T
  • 雑誌名: Cell Adhesion & Migration 2(3) ページ: 208-213
  • 査読あり
• [雑誌論文] ウイルスによる癌治療 (2008)
  • 著者名/発表者名: 福原浩、藤堂具紀
  • 雑誌名: ゲノム医学 8(3) ページ: 173-181
• [雑誌論文] 悪性脳腫瘍に対する樹状細胞療法 (2008)
  • 著者名/発表者名: 田中実、藤堂具紀
  • 雑誌名: 実験医学 26(20) ページ: 3347-3353
• [学会発表] 脳腫瘍のヘルペスウイルス療法の進歩(腫瘍別シンポジウム「脳腫瘍への新たな挑戦」) (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤堂具紀
  • 学会等名: 第67回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20081028-30
• [学会発表] Clinical development of genetically-engineered oncolytic HSV-1 (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤堂具紀
  • 学会等名: 第14回日本遺伝子治療学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20080612-14
• [学会発表] Oncolytic virus therapy using genetically engineered herpes virus (2008)
  • 著者名/発表者名: Todo T
  • 学会等名: 2008 Samsung International Brain Tumor Symposium
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2008-09-27
• [学会発表] がんのウイルス療法の臨床開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤堂具紀
  • 学会等名: 2008年度関東甲信越地区小児がん登録研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-06-28
• [学会発表] Experimental brain tumor therapy using oncolytic HSV-1 armed with interleukin 12 (2008)
  • 著者名/発表者名: Todo T
  • 学会等名: The 17th International Conference on Brain Tu mor Research and Therapy
  • 発表場所: Hakodate, Japan
  • 年月日: 2008-06-09