誤標的された正常細胞をも抗がんに動員する統合的遺伝子治療の新戦略

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20015031
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 許 南浩 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (70142023)
• 研究分担者: 阪口 政清 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (70379840) ; 片岡 健 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (10293317)
• キーワード: REIC / Dkk-3 / がん抑制遺伝子 / がん遺伝子治療

研究概要

REIC/Dkk-3発現アデノウイルスベクター(Ad-REIC)のスキルス胃癌への適用
スキルス胃癌は進行が早く腹膜やリンパ節に転移しやすい難治性のがんの一つである。現在、本がん種を標的とした有効な治療法がない。本年度では、Ad-REICのスキルス胃癌への有効性を検討する目的で、胃がん腹膜播種動物モデルを新規に開発した。Ad-REICを服腔内に投与したところ、胃がん細胞株の腹膜播種の有為な抑制が観察された。これは、Ad-REICの直接効果(がん細胞特異的細胞死誘導)とAd-REICにより誤標的された正常細胞を介した間接効果(正常細胞がIL-7を産生してNK細胞の活性化を誘導)によることが明らかとなった(論文準備中)。
Ad-REICの改良
Ad-REICによるアポトーシス誘導作用を高めるために、強力な遺伝子発現システムを独自に開発した。結果、従来のプロモーター(CAGやCMV)を用いた遺伝子発現システムに比較して顕著な遺伝子発現増強効果(各種遺伝子で、100倍から1000倍)が達成された。このシステムをAd-REICに組み込むことにより、現存のAd-REICを上回る治療効果が期待できる(論文準備中)。
分泌REIC/Dkk-3タンパク質の機能の解明
分泌型REIC/Dkk-3も免疫系を介した間接的抗腫瘍効果を示す。REIC/Dkk-3の発現組織と分泌されたREIC/Dkk-3を積極的に取り込む細胞の同定を行ったところ、分泌されたREIC/Dkk-3は末梢血単球の樹上細胞様細胞への分化・増殖を制御している可能性が示唆された。
REIC/Dkk-3ノックアウトマウスの作製
癌抑制遺伝子REIC/Dkk-3の主要ドメインであるEXON 5、6を全身性にノックアウトしたマウスの作成を行っていたが、2009年10月に、ホモノックアウトマウスの作成に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Down-regulation of BiP/CRP78 sensitizes resistant prostate cancer cells to gene-therapeutic overexpression of REIC/Dkk3 (2010)
  • 著者名/発表者名: Tanimoto R, Sakaguchi M, Abarzua F, Kataoka K, Kurose K, Murata H, Nasu Y, Kumon H, Huh NH
  • 雑誌名: Int J Cancer 126 ページ: 1562 1569
  • 査読あり
• [雑誌論文] REIC/Dkk-3 overexpression downregulates P-glycoprotein in multidrug-resistant MCF7/ADR cells and induces apoptosis in breast cancer (2009)
  • 著者名/発表者名: Kawasaki K, Watanabe M, Sakaguchi M, Ogasawara Y, Ochiai K, Nasu Y, Doihara H, Kashiwakura Y, Huh NH, Kumon H, Date H
  • 雑誌名: Cancer Gene Ther 16 ページ: 65 72
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunological aspects of REIC/Dkk-3 in monocyte differentiation and tumor regression (2009)
  • 著者名/発表者名: Watanabe M, Kashiwakura Y, Huang P, Ochiai K, Fu tami J, Li SA, Takaoka M, Nasu Y, Sakaguchi M, Huh NH, Kumon H
  • 雑誌名: Int J Oncol 34 ページ: 657 663
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of REIC/Dkk-3 in normal fibroblasts suppresses tumor growth via induction of IL-7 (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakaguchi M, Kataoka K, Abarzua F, Tanimoto R, Watanabe M, Murata H, Than SS, Kurose K, Kashiwakura Y, Ochiai K, Nasu Y, Kumon H, Huh NH
  • 雑誌名: J Biol Chem 284 ページ: 14236 14244
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppression of carbon tetrachloride-induced liver fibrosis by transplantation of a clonal mesenchymal stem cell line derived from rat bone marrow (2009)
  • 著者名/発表者名: Hardjo M, Miyazaki M, Sakaguchi M, Masaka T, Ibrahim S, Kataoka K, Huh NH
  • 雑誌名: Cell Transplant 18 ページ: 89 99
  • 査読あり
• [雑誌論文] REIC/Dkk-3 stable transfection reducesthe malignant phenotype of mouse prostate cancer RM9 cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Chen J, Watanabe H, Huang P, Sakaguchi M, Ochiai K, Nasu Y, Ouchida M, Huh NH, Shimizu K, Kashiwakura Y, Kaku H, Kumon H
  • 雑誌名: Int J Mol Med 24 ページ: 789 794
  • 査読あり
• [学会発表] Normal human fibroblasts mis-targetedly infected with adenovirus REIC have a tumor-suppressive ability in vivo (2009)
  • 著者名/発表者名: 阪口政清、片岡健、フェルナンドアバルスア、谷本竜太、渡邉昌美、村田等、スエスエタン、那須保友、公文裕巳、許南浩
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-12
• [学会発表] Promoter-based improvement of gene expression in cancer therapeutic adenovirus vector carrying REIC/Dkk-3 (2009)
  • 著者名/発表者名: 阪口政清、片岡健、村田等、許南浩
  • 学会等名: 第68回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-10-03
• [産業財産権] 遺伝子発現を上昇させるシステム及ぴ該システムを保持したべクター (2009)
  • 発明者名: 阪口政清、公文裕巳、許南浩、渡邉昌美
  • 権利者名: 岡山大学
  • 産業財産権番号: 特願2009-264299号
  • 出願年月日: 2009-11-19