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2010 年度 実績報告書

試験管内進化によるマイクロ抗体の創出

研究課題

研究課題/領域番号 20200033
研究機関大阪府立大学

研究代表者

円谷 健  大阪府立大学, 理学系研究科, 准教授 (00372855)

キーワードペプチド / タンパク質 / 生体分子 / バイオテクノロジー / 進化分子工学 / バクテリオファージ / 試験管内進化 / ケミカルバイオロジー
研究概要

これまでに,ファージ表層提示法により,C末端ヘリックス外側のアミノ酸をランダム変異したヘリックスマイクロ抗体ライブラリーを構築し,マウス顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)受容体に対してスクリーニングを行い,受容体結合性マイクロ抗体の獲得およびその試験管内進化に成功している。昨年度に引き続き,本年度は,マイクロ抗体としての潜在能力を評価した。まずG-CSF受容体結合性マイクロ抗体を用いて抗原性を検討した。続いて新たに,ヒトFcに対するスクリーニングを行い,Fc特異的マイクロ抗体を獲得し,その機能解析を行った。
(1)マイクロ抗体の抗原性の検討:マイクロ抗体,マイクロ抗体-KLHコンジュゲート+アジュバント,およびマイクロ抗体+アジュバントをそれぞれマウスに免疫し,ELISAにより血中抗体価を評価した。その結果,マイクロ抗体のみを注射したマウスの抗体価は上昇せず,抗原性を示さないことが明らかとなった。
(2)ヘリックスライブラリーおよびループライブラリーのヒトFcに対するスクリーニング:新たにヘリックスライブラリーおよびループライブラリーを用いてヒトFcに対してスクリーニングを行い,ヒトFc結合性マイクロ抗体の獲得に成功した。
(3)ヒトFc特異的マイクロ抗体の機能解析:ヒトFc結合性マイクロ抗体について競合ELISA法および表面プラズモン共鳴法を用いて結合活性を評価した。

  • 研究成果

    (16件)

すべて 2011 2010 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (11件) 備考 (1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Structural and energetic hot-spots for the interaction between a ladder-like polycyclic ether and the anti-ciguatoxin antibody 10C9Fab2011

    • 著者名/発表者名
      Mihoko Ui, Yoshikazu Tanaka, Takeshi Tsumuraya, Ikuo Fujii, Masayuki Inoue, Masahiro Hirama, Kouhei Tsumoto
    • 雑誌名

      Mol.BioSyst.

      巻: 7 ページ: 793-798

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 世界最大の食中毒シガテラを予防する:抗シガトキシン抗体の作製とシガトキシン微量検出法の開発2011

    • 著者名/発表者名
      円谷健, 藤井郁雄
    • 雑誌名

      食品機械装置

      巻: 48 ページ: 56-64

  • [雑誌論文] Production of Monoclonal Antibodies for Sandwich Immunoassay Detection of Pacific Ciguatoxins2010

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Tsumuraya, Ikuo Fujii, Masahiro Hirama
    • 雑誌名

      Toxicon

      巻: 56 ページ: 797-803

    • 査読あり
  • [学会発表] CTX1B左端構造を認識するモノクローナル抗体の作製とCTX1Bの微量検出法の開発2011

    • 著者名/発表者名
      円谷健, 竹内勝俊, 山下修治, 平間正博, 藤井郁雄
    • 学会等名
      日本化学会第91春季年会
    • 発表場所
      (日本化学会第91春季年会(2011)講演予稿集)
    • 年月日
      2011-03-11
  • [学会発表] モノクローナル抗体を使ってシガトキシンCTX1Bを検出する2011

    • 著者名/発表者名
      円谷健, 竹内勝俊, 山下修治, 平間正博, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第13回生命化学研究会シンポジウム(冬季)
    • 発表場所
      東北大学さくらホール(宮城県)
    • 年月日
      2011-01-07
  • [学会発表] Thermodynamic and structural basis for transition-state stabilization in antibody-catalyzed hydrolysis2010

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Tsumuraya, Chika Katono, Masayuki Oda, Nobutoshi Ito, Ikuo Fujii
    • 学会等名
      2010環太平洋国際化学会議
    • 発表場所
      Honolulu, USA
    • 年月日
      2010-12-18
  • [学会発表] ホロ抗体酵素:人工補酵素導入型触媒抗体の分子設計2010

    • 著者名/発表者名
      廣瀬仁孝, 石川文洋, 円谷健, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第30回有機合成若手セミナー
    • 発表場所
      大阪府立大学学術交流会館(大阪府)
    • 年月日
      2010-11-10
  • [学会発表] 抗シガトキシン(CTX3C)ヒト化抗体の創製2010

    • 著者名/発表者名
      山口亜佐子, 相野弘明, 円谷健, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第4回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      大阪大学豊中キャンパス(大阪府)
    • 年月日
      2010-09-25
  • [学会発表] ホロ酵素型触媒抗体の分子設計2010

    • 著者名/発表者名
      廣瀬仁孝, 石川文洋, 円谷健, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第27回有機合成化学セミナー
    • 発表場所
      シーサイドホテル舞子ビラ神戸(兵庫県)
    • 年月日
      2010-09-03
  • [学会発表] ヘリックス-ループ-ヘリックスペプチドの高効率スクリーニングをめざした酵母表層提示法の確立2010

    • 著者名/発表者名
      藤井将貴, 植田淳子, 柴崎誠司, 円谷健, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第10回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター(北海道)
    • 年月日
      2010-06-17
  • [学会発表] ヘリックス・ループ・ヘリックスペプチドライブラリーを用いたヒト免疫グロブリンG-Fc領域に結合する新規ペプチドの創出2010

    • 著者名/発表者名
      川端久美子, 西原舞, 円谷健, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第10回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター(北海道)
    • 年月日
      2010-06-17
  • [学会発表] ヒト化抗シガトキシン(CTX3C)抗体の最適化2010

    • 著者名/発表者名
      相野弘明, 山口亜佐子, 円谷健, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第10回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター(北海道)
    • 年月日
      2010-06-17
  • [学会発表] 抗シガトキシン抗体による低分子認識の熱力学的解析およびリガンド設計への指針2010

    • 著者名/発表者名
      宇井美穂子, 田中良和, 円谷健, 藤井郁雄, 井上将行, 平間正博, 津本浩平
    • 学会等名
      第10回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター(北海道)
    • 年月日
      2010-06-17
  • [学会発表] マウス由来抗シガトキシン抗体のヒト化2010

    • 著者名/発表者名
      山口亜佐子, 相野弘明, 円谷健, 藤井郁雄
    • 学会等名
      第10回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター(北海道)
    • 年月日
      2010-06-16
  • [備考]

    • URL

      http://if.b.s.osakafu-u.ac.jp

  • [産業財産権] シガトキシン類CTX1Bおよび54-デオキシCTX1Bを認識するモノクローナル抗体およびそれを用いるシガトキシン類検出キット2010

    • 発明者名
      藤井郁雄, 円谷健, 平間正博, 山下修治
    • 権利者名
      大阪府立大学
    • 産業財産権番号
      特願2010-226734
    • 出願年月日
      2010-10-06

URL: 

公開日: 2012-07-19  

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