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2011 年度 実績報告書

細胞膨圧計測-探針エレクトロスプレーによる細胞分子情報計測

研究課題

研究課題/領域番号 20228004
研究機関愛媛大学

研究代表者

野並 浩  愛媛大学, 農学部, 教授 (00211467)

研究分担者 平岡 賢三  山梨大学, クリーンエネルギー研究センター, 特任教授 (80107218)
キーワード植物 / 細胞・組織 / 農業工学 / 探針エレクトロスプレー / 質量分析 / スピーキング・セル・アプローチ / 膨圧計測 / プレッシャープローブ
研究概要

本研究は、プレッシャープローブで採集した細胞溶液を探針エレクトロスプレーにより直接質量分析するシステムを開発し、植物工場で使用する植物生理情報を制御要素として温度、湿度、培養液濃度、給液量、日射量などを最適化する農業環塊制御を行う新しいスピーキング・プラント・アプローチ(Speaking Plant Approach) (SPA)法を創成することを目的としている。
探針エレクトロスプレーをオンライン化することにより、タンパク質の消化分解の過程を明らかにすることができた。チトクロームCをペプシン消化およびトリプシン消化を行うことで、フラグメント化する過程のリアルタイム計測に成功した。探針の先端を50ナノメートルの小さなものにすることが可能となり、サンプル消費がほとんどなしに、30秒間隔で質量分析を可能にし、リアルタイム質量分析を実現した。
植物細胞での探針エレクトロスプレーイオン化による成分組成同定の結果を、プレッシャープローブで採集した細胞溶液のマトリックス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)でのチェックを行う手法を改善した。プレッシャープローブで採集した細胞溶液体積の計測精度を向上させ、ピコリットル以下でも操作をすることができるように改善した。正確に採集したサンプルの体積を計測する技術は、サンプル内に含まれる組成分子の定量のためには、必須の作業であり、さらに、分子のイオン化条件を決定するためには必要な情報である。プレッシャープローブを用いての植物細胞操作におけるサンプル体積の計測精度を向上させたことから、これまで質量分析で同定してきた分子の定量が可能であるのか、研究を進める基盤が整った。今後、プレッシャープローブの先端への高電圧の印加を行うことで、細胞溶液サンプルの直接イオン化を試み、探針エレクトロスプレーイオン化と並行して、同定と定量が可能であるのか、研究を進展させる予定である。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2012 2011

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件)

  • [雑誌論文] Online Electrospray Ionization Mass Spectrometric Monitoring of Protease-Catalyzed Reactions in Real Time2012

    • 著者名/発表者名
      Zhan Yu, Lee Chuin Chen, Mridul Kanti Mandal, Hiroshi Nonami, Rosa Erra-Balsells, Kenzo Hiraoka
    • 雑誌名

      J.Am.Soc.Mass Spectrom.

      巻: 23 ページ: 728-735

    • DOI

      10.1007/s13361-011-0323-5

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effect of salt stress on physiological response of tomato fruit grown in hydroponic culture system2012

    • 著者名/発表者名
      Md.Mokter Hossain, Hiroshi Nonami
    • 雑誌名

      Hort.Sci.(Prague)

      巻: 39 ページ: 26-32

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of Protein from Detergent Solutions by Probe Electrospray Ionization Mass Spectrometry (PESI-MS)2011

    • 著者名/発表者名
      M.K.Mandal, L.C.Chen, Z.Yu, H.Nonami, R.Erra-Balsells, K.Hiraoka
    • 雑誌名

      Journal of Mass Spectrometry

      巻: 46 ページ: 967-975

    • DOI

      10.1002/jms.1977

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Direct Tissue and Cell Analysis of Tulip Plants by Combining Pressure Probe and UV-MALDI-MS2011

    • 著者名/発表者名
      Nonami, H., Gholipour, Y., Erra-Balsells, R.
    • 雑誌名

      Acta Horticulturae

      巻: 923 ページ: 53-57

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sequential and Exhaustive Ionization of Analytes with Different Surface Activity by Probe Electrospray Ionization2011

    • 著者名/発表者名
      Mridul Kanti Mandal, Lee Chuin Chen, Kenzo Hiraoka
    • 雑誌名

      J.Am.Soc.Mass Spectrom.

      巻: 22 ページ: 1493-1500

    • DOI

      10.1007/s13361-011-0162-4

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Increased Ring-Shaped Chalkiness and Osmotic Adjustment when Growing Rice Grains under Foehn-Induced Dry Wind Condition2011

    • 著者名/発表者名
      Wada H., Nonami H., Yabuoshi Y., Maruyama A., Tanaka A., Wakamatsu K., Sumi T., Wakiyama Y., Ohuchida M., Morita S.
    • 雑誌名

      Crop Sci.

      巻: 51 ページ: 1703-1715

    • DOI

      10.2135/cropsci2010.08.0503

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Fruit growth of tomato associated with water uptake and cell expansion2011

    • 著者名/発表者名
      Md.Mokter Hossain, Hiroshi Nonami
    • 雑誌名

      Journal of Agricultural Technology

      巻: 7 ページ: 1049-1062

    • 査読あり

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公開日: 2013-06-26  

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