ホルモンシグナルの神経系に対するゲノミック/非ゲノミック作用の相関と機能形態解析

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20240036
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 河田 光博 京都府立医科大学, 医学研究科, 教授 (60112512)
• 研究分担者: 時田 美和子 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教 (10420712)
• キーワード: ステロイドホルモン / 受容体 / FRAP / FRET / 核マトリックス / SAFB1 / 動態

研究概要

ホルモンシグナルの神経系に対するゲノミック・非ゲノミック作用を明らかにする目的で、副腎皮質ホルモンや性ホルモンの受容体の細胞内動態をGFPを用いてinvitro系で検索する一方、海馬神経細胞のホルモン変動に対応する変化をinvivoで観察した。エストロゲン受容体ERやプロゲステロン受容体PRはリガンド存在下では最終的に核の中で均一な分布様相から斑点状様態へと変化した。核内での斑点状構造は、クロマチンのリモデリングに関るBrg-1などの分布とよく一致した。蛍光退光後回復像法FRAPや蛍光共鳴エネルギー法FRETを用いて、2種類の異なるホルモン受容体の相互作用と細胞内でのターンオーバーの速さを解析した結果、これらのホルモン受容体は細胞内では核内でヘテロダイマーを作り、またFRETの程度はリガンドの量に依存することが明らかとなった。SAFB1(scaffold attachment factorB1)は核マトリックスへの結合能をもったタンパクとして同定されたが、ER・核マトリクス両者に対して結合能、を有し、転写抑制因子として働くことが知られている。SAFB1はエストロゲン添加時にER同様核内において斑点状の局在パターンを呈した。両者の核内分布や核内挙動に相関があることが予想されたため、FRET解析を行った。ERやPRの核内での分布はリガンドがない状態では核マトリックスと結合せず、可動性が極めて高く、リガンドと結合するとその可動性が低下する事が判明した。これらの培養研究に加え、臨界期において性ホルモンやストレス暴露による生後脳の影響を、分子、細胞、行動面から解析し、これらの連関を性行動との調節において研究を深化させた。DNAクロマチンのメチル化、アセチル化など、エピジェネティックな観点からの解析もあわせて行った

研究成果

• [雑誌論文] Androgen regulates the sexually dimorphic gastrin-releasing peptide system in the lumbar spinal cord that mediates male sexual function. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto H, Kawata M, 他
  • 雑誌名: Endocrinology 150 ページ: 3672-3679
  • 査読あり
• [雑誌論文] Keratinocyte growth inhibition through the modification of Wnt signaling by androgen in balding dermal papilla cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Kitagawa T, Kawata M, 他
  • 雑誌名: Journal of clinical endocrinology and metabolism 94,1288-94 (2009) 94 ページ: 1288-1294
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sagittalis nucleus : a novel hypothalamic nucleus (2009)
  • 著者名/発表者名: Mori H, Matsuda KI, Pfaff DW, Kawata M
  • 雑誌名: Journal of neuroendocrinology 21 ページ: 406-409
  • 査読あり
• [学会発表] PTSD動物モデルによる性機能破綻メカニズム (2009)
  • 著者名/発表者名: 河田光博
  • 学会等名: 第31回日本生物学的精神医学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-04-25
• [備考]
  • URL: http://www.f.kpu-m.ac.jp/k/anatl/index.html