環境ストレスによるゲノム損傷の修復を制御する新たな分子機構の解明

2010 年度 自己評価報告書

• 研究課題/領域番号: 20241013
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 放射線・化学物質影響科学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 菅澤 薫 神戸大学, 自然科学系先端融合研究環バイオシグナル研究センター, 教授 (70202124)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2011
• キーワード: ヌクレオチド除去修復 / 色素性乾皮症 / ユビキチン化 / SUMO化

研究概要

ヌクレオチド除去修復(NER)の開始段階に必須であるDNA損傷認識因子XPCについて、我々が既に見出した翻訳後修飾(ユビキチン化、SUMO化)に着目し、それぞれの修飾を受けるリジン残基の特定、および修飾・脱修飾に関わる因子の同定を行う。
決定された修飾部位に変異を導入したXPCの組換えタンパク質をバキュロウイルス系を用いて発現・精製し、生化学的な性状変化を解析するほか、これらの変異体を安定に発現する形質転換細胞株を単離して、細胞レベルでのNER活性、DNA損傷に伴うタンパク質の安定性や動態変化、およびチェックポイントや細胞死誘導に関わるシグナリングに対する変異の影響などを体系的に調べる。また、修飾部位を特異的に認識する抗体の作成やGFP再構成システムを構築することにより、それぞれの修飾の時空間的動態制御を観察するとともに、相互の機能的連関を明らかにする。さらに、修飾タンパク質と特異的に相互作用する因子を探索することにより、修飾が直接影響を与える細胞機能について分子レベルでの知見を得る。

研究成果

• [雑誌論文] Regulation of damage recognition in mammalian globel genomic nucleotide excision repair (2010)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K
  • 雑誌名: Mutat.Res 685 ページ: 29-37
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stimulation of DNA glycosylase activities by XPC protein complex : roles of protein-protein interactions (2010)
  • 著者名/発表者名: Shimizu Y, Uchimura Y, Dohmae N, Saitoh H, Hanaoka F, Sugasawa K
  • 雑誌名: J.Nucleic Acids doi : 10.4061/2010/805698(2010) 2010
  • 査読あり
• [雑誌論文] UV-DDB-dependent regulation of nucleotide excision repair kinetics in living cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishi R, Alekseev S, Dinant C, Hoogstraten D, Houtsmuller AB, Hoeijmakers JHJ, Vermeuken W, Hanaoka F, Sugasawa K
  • 雑誌名: DNA Repair 8 ページ: 767-776
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two-step recognition of DNA damage for mammalian nucleotide excision repair : directional binding of the XPC complex and DNA strand scanning (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K, Akagi J, Nishi R, Iwai S, Hanaoka F
  • 雑誌名: Mol.Cell 36 ページ: 642-653
  • 査読あり
• [学会発表] Roles for centrin-2 in DNA damage recognition for global genome nucleotide excision repair. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishi R, Tak Y-S, Sakai W, Hanaoka F, Sugasawa K.
  • 学会等名: The 7th 3R Symposium.
  • 発表場所: Toyama, Japan
  • 年月日: 20101026-20101030
• [学会発表] DNA damage recognition mechanism for mammalian nucleotide excision repair. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K.
  • 学会等名: International Conference on Radiation and Cancer Biology.
  • 発表場所: Nagasaki, Japan
  • 年月日: 20100217-20100220
• [学会発表] Post-translational modifications involved in cellular DNA damage response. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K.
  • 学会等名: 2009 Japan-Taiwan Joint Symposium on Cell Signaling and Gene Regulation.
  • 発表場所: Kobe, Japan
  • 年月日: 20091111-20091112
• [学会発表] Coordinated actions of multiple DNA damage detectors in nuleotide excision repair. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K.
  • 学会等名: National Conference on Medical Genomics and Proteomics.
  • 発表場所: Novosibirsk, Russia
  • 年月日: 20090909-20090910
• [学会発表] Molecular mechanism for DNA damage recognition in nucleotide excision repair. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K.
  • 学会等名: International Symposium on DNA Damage Response and Repair Mechanism.
  • 発表場所: Crete, Greece
  • 年月日: 20090420-20090423
• [学会発表] Molecular mechanisms underlying efficient DNA damage recognition for nucleotide excision repair. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K, Nishi R, Akagi J, Tak Y-S, Kobayashi H, Hanaoka F.
  • 学会等名: The 6th 3R Symposium.
  • 発表場所: Kakegawa, Japan
  • 年月日: 20081027-20081030
• [学会発表] Damage recognition mechanism for mammalian nucleotide excision repair. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sugasawa K.
  • 学会等名: Rissian-European Workshop on DNA Repair and Epigenetic Regulation of Genome Stability.
  • 発表場所: St.Petersburg, Russia.
  • 年月日: 20080624-20080626