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本研究は、脂質性シグナル伝達系の鍵分子であるホスファチジルイノシトール 4-リン酸5-キナーゼ(PIP5K)とホスホリパーゼD(PLD)の各アイソザイムの生理機能を解析することを目的としている。その解析方法として、PIP5KとPLDの各アイソザイムと特異的に相互作用するパートナー蛋白質を探索・同定して、それらの機能を基盤として解析を進めること、およびそれぞれのリン脂質代謝酵素の各アイソザイムの遺伝子ノックアウトマウスの作製とそれらの解析により解析を進めることを計画している。
前者の解析には、細胞をアゴニストで刺激した場合に刺激依存的にPIP5KとPLDの各アイソザイムと相互作用する蛋白質を免疫沈降して、それらを同定する必要があるために、これらのリン脂質代謝酵素の各アイソザイムに特異的な抗体を作製することが必須である。これまでに、PIP5Kの三種類のアイソザイム、PIP5Kα、β、γおよびPLDの二種類ののアイソザイム、PLD1とPLD2、に対する特異的坑体の作製を完了し、現在は、刺激依存的に相互作用するパートナー蛋白質を探索中である。
後者の解析においては、現在までに、PIP5KαとPIP5Kβの遺伝子ノッキアウトマウスの作製が完了している。これらのマウスで一見健常であり、寝殖能力も正常であった。しかしながら、PIP5Kα/PIP5Kβダブルノックアウツマウスにおいては、雄が不妊であることが明らかとなった。この不妊マウス・精子を観察したところ、精子尾部が渦巻き状になっており、精子形成に異常が生じていることが明らかとなった。現在は、PIP5KαとPIP5Kβの精子形成への関与に於ける分子メカ二ズムの詳細を解析中である。
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