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我々は、性ステロイドのある種の中枢作用は成長因子の遺伝子発現を介することを見出した。本研究は、本研究はステロイド因子の共役による神経細胞の分化と再生の神経生物学的基盤を確立することを目的としたものである。我々は既に、脳の性遺伝子としてグラニュリン(GRN)遺伝子を同定するとともに、本遺伝子が成熟動物の海馬における神経新生にも関与しているらかにしてきた。本年度はGRNの作用を検討するため、GRNノックアウト(KO)マウスを用いて行動解析を行うとともに、遺伝子パク質の網羅的発現解析を行い、グラニュリンの下流に存在する分子の同定を試みた。雌雄野生型(WT)マウスおよびGRNの視床下部を採取し、遺伝子およびタンパク質の発現解析に供した。遺伝子発現解析では細胞増殖、脂質代謝、神経伝達、などに関連する遺伝子群に変動が認められた。これらの遺伝子に関してReal-time PCRにより発現を解析したところ、Msi2、Ntng1、Kif5c、Nr2c2などの遺伝子発現がGRN KOにおいて変化していた。また、タンパク質発現解析ではLASP1、Pafah1bγ発現が雌雄共にGRN KOにおいて減少していた。LIMホメオボックス遺伝子Lhx1およびLIMドメインを持つタンパク質である発現がGRN KOにおいて減少していたことから、神経細胞の分化や発達に関与していると考えられているLIMドメインをもつタがグラニュリンの機能発現に関与していることが示唆された。さらに、培養神経前駆細胞を用いてGRNの細胞内情報伝達機構解析したところ、GRNの作用の少なくとも一部はGSK3βのリン酸化を介して発現していることが示唆された。
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