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2009 年度 実績報告書

含塩素有機リン酸トリエステル類の微生物分解に必須な新規分解酵素とその遺伝子の解明

研究課題

研究課題/領域番号 20310039
研究機関長岡技術科学大学

研究代表者

解良 芳夫  長岡技術科学大学, 工学部, 教授 (00137168)

研究分担者 高橋 祥司  長岡技術科学大学, 工学部, 准教授 (90324011)
キーワード難分解性有害物 / 含塩素有機リン酸トリエステル類 / 微生物分解 / 新規分解酵素 / トリエステラーゼ / 遺伝子 / クローニング
研究概要

Tris(1,3-dichloro-2-propyl)phosphate(以下TDCPP)やTris(2-chloroethyl)phosphate(以下TCEP)などの塩素を含む有機リン酸トリエステル類は、難分解性で蓄積性があり、種々の毒性を有する。我々が世界で初めて単離に成功した含塩素有機リン酸トリエステル類の分解菌Sphingomonas sp.TDK1とSphingobium sp.TCM1に存在する新規分解酵素を単離・精製し、その特徴を明らかにするとともに当該酵素遺伝子を取得し、解析を行うことが本研究の目的である。
平成21年度は以下の研究実績をあげた。
Sphingomonas sp.TDK1株のTDCPP初発分解酵素であるホスホトリエステラーゼ遺伝子のクローニングを行った。TDK1株より精製したホスホトリエステラーゼをリジルエンドペプチダーゼで消化後、得られたペプチド断片のアミノ酸配列を解析した。このアミノ酸配列から設計した縮重プライマーを用いたPCRにより部分遺伝子断片を取得した後、インバースPCR法で遺伝子全長の塩基配列を決定した。
更に、Sphingobium sp.TCM1株のTCEP初発分解酵素であるホスホトリエステラーゼの遺伝子のクローニングも行い、遺伝子全長の塩基配列を決定した。
TDK1株およびTCM1株のホスホトリエステラーゼの遺伝子は極めて高い相同性を示した。しかし、両酵素遺伝子はこれまでよく研究されている、P.diminutaやFlavobacteriumのホスホトリエステラーゼとは相同性を示さず、Burkholderia sp.strain NF100のフェニトロチオン加水分解酵素と低い相同性を示した。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2010 2009

すべて 学会発表 (5件)

  • [学会発表] ハロアルキル基含有有機リン酸トリエステルを分解する新規ホスホトリエステラーゼ遺伝子のクローニング2010

    • 著者名/発表者名
      阿部勝正.鈴木雄斗・山田裕里恵・高橋祥司・解良芳夫
    • 学会等名
      日本農芸化学会2010年度大会
    • 発表場所
      東京都、東京大学駒場Iキャンパス
    • 年月日
      2010-03-28
  • [学会発表] ハロアルキル基含有有機リン酸トリエステルを分解する新規ホスホトリエステラーゼの機能解析2009

    • 著者名/発表者名
      阿部勝正・森淳一・鈴木雄斗・山田裕里恵・高橋祥司・解良芳夫
    • 学会等名
      第82回日本生化学会大会
    • 発表場所
      神戸市、神戸国際展示場
    • 年月日
      2009-10-23
  • [学会発表] Shhingomonas sp.TDK1 株tris(1,3-dichloro-2-propy1)phoshate分解酵素の諸特性解析.2009

    • 著者名/発表者名
      鈴木雄斗・山田裕里恵・森淳一・阿部勝正・高橋祥司・解良芳夫
    • 学会等名
      第61回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      名古屋市、名古屋大学東山キヤンパス
    • 年月日
      2009-09-24
  • [学会発表] Sphingobium sp.TCM1株tris(1,3-dichloro-2-propy1)phoshate分解酵素の諸特性解析.2009

    • 著者名/発表者名
      吉田知史・高橋祐樹・土井由佳・阿部勝正・高橋祥司・解良芳夫
    • 学会等名
      第61回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      名古屋市、名古屋大学東山キャンパス
    • 年月日
      2009-09-24
  • [学会発表] 難分解性難燃剤リン酸トリス(1,3-ジクロロ-2-プロピル)の微生物的無害化処理の検討.2009

    • 著者名/発表者名
      高橋祥司・尾花友規・岡田庄平・阿部勝正・解良芳夫
    • 学会等名
      第61回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      名古屋市、名古屋大学東山キヤンパス
    • 年月日
      2009-09-23

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公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

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