包括的機能研究のためのノックイン胚性幹細胞作製の迅速化と解析

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20310123
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用ゲノム科学
• 研究機関: (財)かずさDNA研究所
• 研究代表者: 中山 学 (財)かずさDNA研究所, ヒトゲノム研究部・ヒト遺伝子応用技術研究室, 主任研究員 (30370927)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 遺伝子 / ゲノム / 機能ゲノム / 動物 / 発生・分化 / バイオテクノロジー / 病態モデル動物

研究概要

ノックインマウスはマウス個体レベルで蛋白質の機能を解析するために極めて有用な手法である。大腸菌内での相同組み換え反応により自由にDNAが改変できるRed/ET組み換えの手法を用いることで、ノックイン作製用のベクターを包括的に迅速に作製するシステムとノックインを行なう目的の蛋白質のC末端部分に交換可能なタグを導入するシステムを構築した。また、ES細胞のゲノムを複雑で緻密に改変することができるように新しい2種類の部位特異的組み換え酵素システムを開発した。

研究成果

• [雑誌論文] Recombinase-mediated cassette exchange (RMCE) and BAC engineering via VCre/VloxP and SCre/SloxP systems. (2011)
  • 著者名/発表者名: Minorikawa S., Nakayama M.
  • 雑誌名: BioTechniques Vol.50 ページ: 235-246
  • 査読あり
• [雑誌論文] VCre/VloxP and SCre/SloxP : new site-specific recombination systems for genome engineering. (2011)
  • 著者名/発表者名: Suzuki E., Nakayama M.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. Vol.39 ページ: e49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extracellular Calcium Controls Background Current and Neuronal Excitability via an UNC79-UNC80-NALCN Cation Channel Complex. (2010)
  • 著者名/発表者名: Lu B., Zhang Q., Wang H., Wang Y., Nakayama M., Ren D.
  • 雑誌名: Neuron Vol.68 ページ: 488-499
  • 査読あり
• [雑誌論文] Defining the immunological phenotype of Fc receptor-like B (FcRLB) deficient mice : confounding role of the inhibitory Fc γ RIIb. (2010)
  • 著者名/発表者名: Masuda K., Mori H., Ohara O., Nakayama M., Wang J., Burrows P.
  • 雑誌名: Cellular Immunology Vol.266 ページ: 24-31
  • 査読あり
• [雑誌論文] Homologous recombination in human iPS and ES cells for use in gene correction therapy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakayama M.
  • 雑誌名: Drug Discov.Today Vol.15 ページ: 198-202
  • 査読あり
• [雑誌論文] Eliminating target cells by inducing apoptosis-related factors using hTERT promoter. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takashina T., Nakayama M.
  • 雑誌名: Open Biotechnol J Vol.4 ページ: 1-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Requirement of MARCH-I-mediated MHC II ubiquitination for the maintenance of conventional dendritic cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohmura-Hoshino M, Matsuki Y, Mito-Yoshida M, Goto E, Aoki-Kawasumi M, Nakayama M, Ohara O, Ishido S
  • 雑誌名: J Immunol. Vol.11 ページ: 6893-6897
  • 査読あり
• [雑誌論文] Engineered FADD induces apoptosis via an artificial death-inducing signaling complex (DISC). (2009)
  • 著者名/発表者名: Suzuki E, Takashina T., Nakayama M.
  • 雑誌名: Int J Biomed Sci. Vol.5 ページ: 237-245
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cell therapy using induced pluripotent stem (iPS) cells meets next-next generation DNA sequencing technology. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakayama M.
  • 雑誌名: Curr.Genomics Vol.10 ページ: 303-305
  • 査読あり
• [雑誌論文] The zinc transporter SLC39A13/ZIP13 is required for connective tissue development ; its involvement in BMP/TGF-beta signaling pathways. (2008)
  • 著者名/発表者名: Fukada T, Civic N, Furuichi T, Shimoda S, Mishima K, Higashiyama H, Idaira Y, Asada Y, Kitamura H, Yamasaki S, Hojyo S, Nakayama M, Ohara O, Koseki H, Dos Santos HG, Bonafe L, Ha-Vinh R, Zankl A, Unger S, Kraenzlin ME, Beckmann JS, Saito I, Rivolta C, Ikegawa S, Superti-Furga A, Hirano T
  • 雑誌名: PLoS ONE. Vol.3 ページ: e3642
  • 査読あり
• [学会発表] 新規部位特異的組み換えシステムを用いたゲノム改変技術の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中山学
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸ポートピアホテル
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] ノックイン胚性幹細胞作製の迅速化と新規ゲノム改変技術の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 中山学
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2009-12-11
• [学会発表] 包括的機能研究のためのノックイン胚性幹細胞作製の迅速化と解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中山学
  • 学会等名: BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2008-12-11
• [備考] ホームページ等
• [産業財産権] 新規な部位特異的組換え酵素とその認識配列を用いた部位特異的組換え方法 (2009)
  • 発明者名: 中山学
  • 権利者名: かずさDNA研究所
  • 産業財産権番号: 特許,2009-248439
  • 出願年月日: 2009-10-29
• [産業財産権] 新規な部位特異的組換え酵素とその認識配列を用いた部位特異的組換え方法 (2009)
  • 発明者名: 中山学
  • 権利者名: かずさDNA研究所
  • 産業財産権番号: 特許,特願2009-136830
  • 出願年月日: 2009-06-08