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2010 年度 実績報告書

ゴルジ体から小胞体への逆行輸送機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 20370050
研究機関東京薬科大学

研究代表者

多賀谷 光男  東京薬科大学, 生命科学部, 教授 (30179569)

研究分担者 有光 なぎさ  東京薬科大学, 生命科学部, 助教 (40408688)
原田 彰宏  大阪大学, 医学部, 教授 (40251441)
キーワード組織・細胞 / 小胞体 / 蛋白質 / 膜輸送
研究概要

1) 動物細胞におけるRer1の局在
酵母においてはRer1はゴルジ体に存在することが報告されているが、動物細胞にはゴルジ体以外に小胞体-ゴルジ体中間区画(ERGIC)が存在する。ヒト由来のHeLa細胞におけるRer1の局在を細胞分画等を用いて調べたところ、Rer1はゴルジ体ではなくERGICに存在することが判明した。
2) Rer1とKDEL受容体のライブセルイメージング
Rer1とKDEL受容体はともにゴルジ体から小胞体への逆行輸送に関与するが、異なるタイプのカーゴを輸送する。GFP-Rer1およびKDEL受容体-mRFPを利用し、生細胞イメージングによって両者の挙動を比較した。その結果、Rer1がERGICに存在するのに対して、KDEL受容体はシスゴルジに存在し、両者は異なる経路で小胞体へ戻っていることが判明した。
3) Rer1の発現抑制におけるERGIC構造の変化
Rer1の発現抑制によって、ERGIC構造が分散し、そこに存在するタンパク質が小胞体へ戻ることが判明した。またERGICの消失によってゴルジ体の形成速度は促進されていた。すなわち、Rer1は自分自身が機能するための膜区画を形成するのに役立っているということになる。
4) Rer1とERGIC-53の相互作用
FLA6-Rer1を発現させ、抗FLAG抗体を用いて免疫沈降させ、Rer1との相互作用を調べたところ弱いながら結合していることが判明した。
5) BNIPのKOマウスの解析
BMP1のKOマウスの解析については実験をあまり進めることができなかった。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2010 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Golgi-localized KIAA0725p regulates membrane trafficking from the Golgi apparatus to the plasma membrane in mammalian cells.2010

    • 著者名/発表者名
      Sato, S., et al.
    • 雑誌名

      FEBS Lett.

      巻: 584 ページ: 4389-4395

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Molecular characterization of a trafficking organelle : dissecting the axonal paths of calsyntenin-1 transport vesicles.2010

    • 著者名/発表者名
      Steuble, M., et al.
    • 雑誌名

      Proteomics

      巻: 10 ページ: 3775-3788

    • 査読あり
  • [学会発表] KIAA0725p/DDHD2, a mammalian Golgi-associated phospholipase A1, regulates membrane trafficking from the Golgi apparatus to the plasma membrane.2010

    • 著者名/発表者名
      Inoue, H., Sato, S., Kogure, T., Arimitsu, N., Tagaya, M., Tani, K.
    • 学会等名
      Sapporo International Cancer Symposium 2010 "Membranetraffic and Cancer"
    • 発表場所
      Sapporo
    • 年月日
      20100627-20100629
  • [備考]

    • URL

      http://www.ls.toyaku.ac.jp/Life-Science/lmcb-6/

URL: 

公開日: 2012-07-19  

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