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2010 年度 実績報告書

キメラ菌体によるパクテリアべん毛モーターのエネルギー変換・情報伝達機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 20370056
研究機関東北大学

研究代表者

石島 秋彦  東北大学, 多元物質科学研究所, 教授 (80301216)

キーワードバクテリア / 回転計測 / モータータンパク / 温度 / トルク
研究概要

バクテリアべん毛モーターは,1菌体に4~5本のべん毛モーターを有し,それらの回転方向の転換を同期させて起こすことによりよりよい環境に向かって遊泳する.その回転方向転換は受容体からの情報を細胞内部のリン酸化タンパクの状態を変換し,各モーターに伝えることで起こると考えられているが,その詳細はまだよくわかっていない.
我々は,高速度カメラを用いて,複数のモーターの回転をサブ秒,数度の分解能で同時に計測するシステムを開発した.その結果,各モーターの回転方向の転換は同期しており,さらにそのタイミングは受容体に近いモーターから起こり,サブ秒の時間遅れで次のモーターに伝わって起こることがわかった.これらの知見は,従来考えられてきた解釈と異なり,高分解能計測システムにより明らかになったものである.これらの結果は,Biophysical Journalに掲載予定である.
また,細胞外部からの刺激への応答を明らかにするために,caged化合物を作成し,水銀ランプ照射による応答を計測した.その結果,水銀ランプ照射により,モーターの回転方向は,CCW(反時計回り)となり,数十秒後に,また元の状態に戻った.この結果は,caged化合物が有効に機能していることを示唆する.さらに,レーザーによる局所照射により,高時間・空間分解能の刺激システムを開発し,細胞の応答を計測した.
また,モーターの回転を直接計測することをめざし,モーター基部体構成タンパク質にGFPを融合させ,その偏光からモーター基部体の回転を直接計測するシステムを構築した.GFPの偏光は蛍光を偏光ビームスプリッターで分割し,同一カメラに投影することにより,計測を試みた.その結果,GFPのS,P偏光の強度がステージの回転とともに排他的に変化することに成功した.

  • 研究成果

    (11件)

すべて 2010

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (7件)

  • [雑誌論文] Verification of Single-Molecule imaging and Single-Molecule Measurements2010

    • 著者名/発表者名
      Akihiko Ishijima, Hajime Fukuoka, Yuichi Inoue
    • 雑誌名

      Journal of Robotics and Mechatronics

      巻: 5 ページ: 368-578

  • [雑誌論文] Adhesion Effects of a Guanidinium Ton Appended Dendritic "Molec ular Glue" on the ATP-Driven Sliding Motion of Actomyosin.2010

    • 著者名/発表者名
      Okuro, K., Kinbara, K., Takeda, K., Inone, Y., Ishijima, A., Aida, T.
    • 雑誌名

      Angew Chem Int Ed Engl.

      巻: 49 ページ: 3030-3033

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Thermosensing function of the Escherichia coli redox sensor Aer2010

    • 著者名/発表者名
      Nishiyama, S., Ohno, S., Ohta, N., Inoue, Y., Fukuoka, H., Tshijima, A., Kawagishi, I.
    • 雑誌名

      J Bacteriol

      巻: 192 ページ: 1740-1743

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Two methods of temperature control for single-molecule measurements2010

    • 著者名/発表者名
      Matthew A.B.Baker, Yuichi Inoue, Kuniaki Takeda, Akihiko Ishijima, Richard M.Berry
    • 雑誌名

      European Biophysics Journal

      巻: 5 ページ: 651-660

    • 査読あり
  • [学会発表] Synchronous regulation of multiple flagellar motors on a single Escherichia coli cell2010

    • 著者名/発表者名
      Hajime Fukuoka, Shun Terasawa, Yuichi Innue, Hiroto Takahashi, Akihiko Ishijima
    • 学会等名
      第48回日本物物理学会年会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      20100920-20100922
  • [学会発表] Analysis of torque steps of the bacterial flagellar motor indused by heating.2010

    • 著者名/発表者名
      Yuichi Tnoue, Hajime Fukuoka, Akihiko Ishijima.
    • 学会等名
      第48回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      20100920-20100922
  • [学会発表] Construction of the optical system detecting the orientation of molecule from the polarization of fluorescence.2010

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Shimizu, Hajime Fukuoka, Yuichi Inone, Hiroto Takahashi, Akihiko Ishijima.
    • 学会等名
      第48回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      20100920-20100922
  • [学会発表] Measurement of rotation of multiple flagellar me tore on a single cell with chemotactic substrate2010

    • 著者名/発表者名
      Takashi Sagawa, Hajime Fukuoka, Hiroto Takahashi, Yu Kikuchi, Yuichi Inoue, Akihiko Ishijima
    • 学会等名
      第48回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      20100920-20100922
  • [学会発表] Measurement of rotational behavior of flagell ar motors in E.cob induced by caged serine.2010

    • 著者名/発表者名
      Yu Kikushi, Hajime Fukuoka, Yuichi Inoue, Hiroto Takaha shi, Takahiro Muraoka, Kazushi Kimbara, Akihiko Ishijima
    • 学会等名
      第48回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      20100920-20100922
  • [学会発表] Single molecule measurement of actomyosin motors at low temperature.2010

    • 著者名/発表者名
      Hiroyasu Aizawa, Yuichi Inoue, Akihiko Ishijima.
    • 学会等名
      第48回日本物耀学飾会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      20100920-20100922
  • [学会発表] Direct observation of carbon nanotube in solution by surfactant-terminated fluorescent labeling.2010

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Matsutaka, Takeru Okada, Yuichi Inoue, Hajime Fukuoka, Shahbaz Khan, Shige H.Yoshimura, Akihiko Ishijima
    • 学会等名
      第48回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      2010-09-20

URL: 

公開日: 2012-07-19  

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