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2010 年度 自己評価報告書

プロテアソームの単粒子解析による構造研究

研究課題

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研究課題/領域番号 20370065
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 生物物理学
研究機関独立行政法人産業技術総合研究所

研究代表者

光岡 薫  独立行政法人産業技術総合研究所, バイオメディシナル情報研究センター, 研究チーム長 (60301230)

研究期間 (年度) 2008 – 2012
キーワードプロテアソーム / 電子顕微鏡 / 画像解析
研究概要

エピトープタグをプロテアソームサブユニット遺伝子に付加した出芽酵母より高純度の26Sプロテアソームを大量にアフィニティー精製し、その標品を極低温電子顕微鏡で観察、その投影像を撮影する。その画像から26S粒子を切り出し、単粒子解析により、その立体構造を再構成する。
エピトープタグを付加した野生型の26S複合体以外に、ユビキチン受容サブユニットRpn10などを欠損した各種変異体の立体構造を得て、それらを比較することで、19S中のサブユニットの位置を特定する。また、分解基質が結合したプロテアソームについても立体構造を決定し、基質を活性部位に輸送する機能に関する知見も得る。

  • 研究成果

    (10件)

すべて 2011 2010 2009 2008 その他

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (3件) 図書 (1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Obtaining high-resolution images of biological macromolecules by using acryo-electron microscope with a liquid-helium cooled stage.2011

    • 著者名/発表者名
      Mitsuoka, K.
    • 雑誌名

      Micron 42

      ページ: 100-106

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Helical image reconstruction of the outward-open human erythrocyte band 3 membrane domain in tubular crystals2010

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi, T., Fujii, T., Abe, Y., Hirai, T., Kang, D., Namba, K., Hamasaki, N., Mitsuoka, K.
    • 雑誌名

      J Struct Biol. 169

      ページ: 406-412

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Multiple proteasome-interacting proteins assist the assembly of the yeast 19S regulatory particle2009

    • 著者名/発表者名
      Saeki, Y., Toh-e, A., Kudo, T., Kawamura, H., Tanaka, K.
    • 雑誌名

      Cell 29

      ページ: 900-913

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Lysine 63-linked polyubiquitin chain may serve as a targeting signal for the 26S proteasome2009

    • 著者名/発表者名
      Saeki, Y., Kudo, T., Sone, T., Kikuchi, Y., Yokosawa, H., Toh-e, A., Tanaka, K.
    • 雑誌名

      EMBO J. 18

      ページ: 359-371

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Evaluation of a 2k CCD camera with an epitaxially grown CsI scintillator for recording energy-filtered electron cryo-micrographs2008

    • 著者名/発表者名
      Yasunaga, T., Wakabayashi, T.
    • 雑誌名

      J.Electron Microsc. 57

      ページ: 101-112

    • 査読あり
  • [学会発表] Single particle analysis of the 26S proteasome by high-resolution electron cryo-microscopy and advanced image analysis2010

    • 著者名/発表者名
      Okuma, Y., Kasuya, D., Mitsuoka, K., Saeki, Y., Yasunaga, T.
    • 学会等名
      日本生物物理学会第48回年会
    • 発表場所
      東北大学・川内北キャンパス
    • 年月日
      2010-09-21
  • [学会発表] 多種の処理ツールの統合による半自動3次元再構成システムの開発2008

    • 著者名/発表者名
      新名人士、谷口香苗、西野有里、岩崎憲治、高木淳一、宮澤淳夫、光岡薫、安永卓生
    • 学会等名
      第46回日本生物物理学会
    • 発表場所
      福岡国際センター
    • 年月日
      20081203-20081209
  • [学会発表] 電子顕微鏡画像処理システムEos2の構築2008

    • 著者名/発表者名
      安永卓生、岩崎憲治、宮澤淳夫
    • 学会等名
      第46回日本生物物理学会
    • 発表場所
      福岡国際センター
    • 年月日
      20081203-20081205
  • [図書] ナノイメージング(第一編ナノイメージングを可能にする顕微鏡法・第3章電子顕微鏡を用いたナノイメージング)2008

    • 著者名/発表者名
      安永卓生(共著)
    • 総ページ数
      15
    • 出版者
      (株)NTS
  • [備考] ホームページ

    • URL

      http://www.rinshoken.or.jp/activities/t090514.html

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公開日: 2012-02-13   更新日: 2016-04-21  

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