| 研究課題/領域番号 |
20380020
|
|---|
| 研究機関 | 京都大学 |
|---|
研究代表者 |
細川 宗孝 京都大学, 農学研究科, 准教授 (40301246)
|
|---|
| 研究分担者 |
海道 真典 京都大学, 農学研究科, 助教 (20314247)
松下 陽介 花き研究所, 研究員 (00414665)
|
|---|
| キーワード | キクわい化ウイロイド(CSVd) / ポスピウイロイド / 長距離移行 / 機能性RNA / キク / タバコ / アラビドプシス / プロモーター活性 |
|---|
| 研究概要 |
ウイロイドはタンパク質のコード領域を持たない環状の低分子RNAであり、植物にわい化や早期開花などの病徴を引き起こす。これらの病徴はウイロイドが植物体に何らかの機能性を持つRNAとして振る舞うために引き起こされるものと考えられる。重要な病気としてウイロイドは多くの研究事例が報告されているが、機能性を園芸的に利用することを目的として研究した報告は見あたらない。本研究では、特に1.ウイロイドの持つRNAを鋳型にするRNA増幅機構および、2.長距離移行能を対象として、園芸的な利用方法を探った。
1.ポスピウイロイドは自身の増幅に植物のDNA依存RNAポリメラーゼを利用する。これはウイロイド配列にポリメラーゼのターゲット配列があることを意味する。そこでキクわい化ウイロイド(CSVd)をGUS遺伝子につなげて、タバコに組み換えタバコでのGUS遺伝子の発現量を調べた。35Sプロモーターに+鎖あるいは一鎖のCSVd配列をつなげると、GUSの発現量が増加した。これは昨年度の実験でも示唆された結果であり、今回その再現性が確認された。
2.ウイロイドの持つ長距離移行性を司る配列を同定する実験を行った。様々な長さと大きさを持つCSVdの両末端に付加配列を付けたRNAをアグロインフィルタレーションでタバコに接種し、その移行性を調査した。明らかな移行性を持つと思われる配列が確認された。現在さらに、全てのは配列について組み換え体を作成し、その接ぎ木移行性を確認している。
|
