トランスポゾンタギング法によるウイルス感染増殖に関与する宿主遺伝子の網羅的同定

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20380111
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 水産学一般
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 冲中 泰 広島大学, 大学院・生物圏科学研究科, 准教授 (80363034)
• 連携研究者: 中井 敏博 広島大学, 大学院・生物圏科学研究科, 教授 (60164117)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: ベータノダウイルス / 宿主因子 / トランスポゾンタギング / 遺伝子破壊系 / 魚類培養細胞

研究概要

染色体数が25であるメダカ(Oryzias latipes)HNI-2細胞系(メダカの正常染色体数は2n=48)をクローニングし、それへのトランスポゾン挿入による遺伝子破壊およびベータノダウイルス感染実験を行った結果、ウイルスに耐性でかつGFP(トランスポゾンコードのマーカー遺伝子)を発現する細胞系を17系統得た。これらウイルス耐性細胞からトランスポゾン近傍領域のDNA断片を11種取得し、その配列を用いてEnsemblメダカゲノムデータベースに対するblastn検索を行った結果、9系統のDNAに対応する配列が得られ、このうち5つがコード領域であった。

研究成果

• [雑誌論文] Susceptibilities of medaka (Oryzias latipes) cell lines to a betanodavirus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Adachi, K., Sumiyoshi, K., Ariyasu, R., Yamashita, K., Zenke, K., Okinaka, Y.
  • 雑誌名: Virol.J. 7 ページ: 150
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of RNA regions that determine temperature sensitivity in betanodaviruses. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hata N., Okinaka, Y., Iwamoto, T., Kawato, Y., Mori, K., Nakai, T.
  • 雑誌名: Arch.Virol. 155 ページ: 1597-1606
  • 査読あり
• [雑誌論文] Trash fish can be a source of betanodaviruses for cultured marine fish. (2010)
  • 著者名/発表者名: Gomez, D.K., Mori, K., Okinaka, Y., Nakai, T., Park, S.C.
  • 雑誌名: Aquaculture. 302 ページ: 158-163
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic heterogeneity of betanodaviruses in juvenile production trials of Pacific bluefin tuna, Thunnus orientalis (Temminck & Schlegel). (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugaya, T., Mori, K., Nishioka, T., Masuma, S., Oka, M., Mushiake, K., Okinaka Y., Nakai T.
  • 雑誌名: J.Fish Dis. 32 ページ: 815-823
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic analysis and pathogenicity of betanodavirus isolated from wild redspotted grouper Epinephelus akaara with clinical signs. (2009)
  • 著者名/発表者名: Gomez, D.K., Matsuoka, S., Mori, K., Okinaka, Y., Park, S.C., Nakai, T.
  • 雑誌名: Arch.Virol. 154 ページ: 343-346
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparisons among the complete genomes of four betanodavirus genotypes. (2008)
  • 著者名/発表者名: Okinaka, Y., Nakai, T.
  • 雑誌名: Dis.Aquat.Org. 80 ページ: 113-121
  • 査読あり
• [雑誌論文] The variable region of RNA2 is sufficient to determine host specificity in betanodaviruses. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ito, Y., Okinaka, Y., Mori, K., Sugaya, T., Nishioka, T., Oka, M., Nakai, T.
  • 雑誌名: Dis.Aquat.Org. 79 ページ: 199-205
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phylogenetic analysis of betanodavirus RNA2 identified from wild marine fish in oceanic regions. (2008)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto, T., Okinaka, Y., Mori, K., Sugaya, T., Nishioka, T., Yamashita, H., Oka, M., Nakai, T.
  • 雑誌名: Fish Pathol. 43 ページ: 19-27
  • 査読あり
• [学会発表] メダカ培養細胞におけるRNA干渉を利用した遺伝子ノックダウン法の最適化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 善家孝介、冲中泰
  • 学会等名: 日本魚病学会、三重大学
  • 発表場所: 津
  • 年月日: 20100921-20100922
• [学会発表] ベータノダウイルスの温度感受性機構の解明?IIIRGNNV型近縁株を用いた研究の効率化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 有安亮、冲中泰
  • 学会等名: 日本魚病学会
  • 発表場所: 三重大学、津
  • 年月日: 20100921-20100922
• [学会発表] メダカ培養細胞におけるRNA干渉誘導法の最適化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 善家孝介、冲中泰
  • 学会等名: 小型魚類研究会、プラザイースト
  • 発表場所: さいたま
  • 年月日: 20100918-20100919
• [学会発表] メダカ由来細胞株におけるベータノダウイルス増殖性の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 足立圭、有安亮、住吉洸介、冲中泰
  • 学会等名: 日本ウイルス学会、都市センターホテル
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20091025-20091027
• [学会発表] ベータノダウイルスの感染・増殖に適したメダカ培養細胞の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 冲中泰、足立圭、有安亮、住吉洸介
  • 学会等名: 小型魚類研究会
  • 発表場所: 名古屋大学、名古屋
  • 年月日: 20090912-20090913
• [学会発表] ベータノダウイルスの温度感受性機構の解明-II 温度感受性に関わるゲノム領域の特定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 冲中泰・端直美・河東康彦・中井敏博
  • 学会等名: 日本水産学会
  • 発表場所: 東京海洋大学、東京都
  • 年月日: 20090327-20090331
• [学会発表] ベータノダウイルスの宿主特異性決定機構の解明III 細胞膜上レセプター以外の決定機構の有無 (2009)
  • 著者名/発表者名: 河東康彦・冲中泰・中井敏博・山下浩史
  • 学会等名: 日本水産学会
  • 発表場所: 東京海洋大学、東京都
  • 年月日: 20090327-20090331
• [学会発表] Genotype-specific binding of betanodaviruses to sevenband grouper cultured cells, SGF. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kawato, Y., Okinaka Y., Yamashita H., Nakai T.
  • 学会等名: In 7th Symposium on Diseases in Asian Aquaculture
  • 発表場所: Taipei, Taiwan
  • 年月日: 20080622-20080626
• [備考] ホームページ等