研究課題
ICR系雌マウスから回収した1細胞期胚と卵核胞期卵子を、体細胞で水・耐凍剤チャンネルであるaquaporin 3を誘導することが知られているレチノイン酸またはデキサメサゾンを添加した培養液、あるいはソルビトールを含む高張な培養液で培養し、それぞれ2～4細胞期胚あるいは成熟卵子にまで発育させた。そして、その水に対する透過性と耐凍剤(エチレングリコール、グリセロール、プロピレングリコール、アセトアミド、DMSO)に対する透過性が向上するかどうかをしらべた。胚の場合は、種々の濃度のレチノイン酸、デキサメサゾンあるいはソルビトールで処理しても水透過性と耐凍剤透過性に大幅な向上は見られなかった。卵子の場合も水透過性は向上しなかった。しかしながら、レチノイン酸を添加した培養液で成熟させた卵子は、エチレングリコール、グリセロールおよびプロピレングリコールに対する透過性は向上しなかったが、DMSOとアセトアミドに対する透過性が大きく向上した。また、高張条件で培養した卵子においても、DMSOとアセトアミドに対する透過性は向上したが、成熟しなかった。これらの透過特性から、aquaporin 3以外の耐凍剤チャンネルが誘導されたと考えられる。そこで、レチノイン酸を添加した培養液で成熟させた卵子を、DMSO液をベースにした保存液を用いてガラス化凍結した結果、融解後の生存率が無処理卵子と比べて大きく向上した。これらの結果から、卵子が成熟する過程で耐凍剤チャンネルを誘導することによって、卵子の耐凍性を向上させることが可能であることがわかった。
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