ニワトリ始原生殖細胞操作法の開発と形質転換ニワトリ作出への応用に関する研究

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20380156
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 独立行政法人農業生物資源研究所
• 研究代表者: 内藤 充 独立行政法人農業生物資源研究所, 動物発生分化研究ユニット, 上級研究員 (70355733)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2012
• キーワード: 始原生殖細胞 / 外来遺伝子 / トランスフェクション / GFP遺伝 / ニワトリ初期胚 / 生殖系列キメラ / 品種識別 / 体外培養

研究概要

研究成果の概要(和文):本研究では、形質転換ニワトリ作出法の開発を目的として、初期胚より採取した始原生殖細胞をインビトロで長期に培養する方法を開発した。培養始原生殖細胞は、レシピエント胚生殖巣への移住能を有するとともに、正常な配偶子への分化能を保持していることが確認できた。また、培養始原生殖細胞へのGFP遺伝子の導入は可能で、GFP遺伝子を発現する培養始原生殖細胞をレシピエント胚生殖巣へ導入することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Expression of GFP gene in cultured PGCs isolated from embryonic blood and incorporation into gonads of recipient embryos (2012)
  • 著者名/発表者名: Naito M, Harumi T and Kuwana T
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 巻: 49(2) ページ: 116-123
  • DOI: DOI:10.2141/ jpsa.011094
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long term in vitro culture of chicken primordial germ cells isolated from embryonic blood and incorporation into germline of recipient embryo (2010)
  • 著者名/発表者名: Naito M, Harumi T and Kuwana T
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 巻: 47(1) ページ: 57-64
  • DOI: DOI:10.2141/jpsa.009058
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preferential migration of transferred primordial germ cells to left germinal ridge of recipient embryos in chickens (2009)
  • 著者名/発表者名: Naito M, Minematsu T, Harumi T and Kuwana T
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 巻: 46(1) ページ: 40-45
  • DOI: DOI:10.2141/ jpsa.46.40
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantitative genotyping by amplifying the polymorphic sequences of Pre-Melanosomal Protein (PMEL17) gene using real-time polymerase chain reaction in chickens. (2008)
  • 著者名/発表者名: Minematsu T, Harumi T and Naito M
  • 雑誌名: British Poultry Science 巻: 49(5) ページ: 542-549
  • DOI: DOI:10.1080/00071660802298310
  • 査読あり
• [雑誌論文] Germ cell-specific expression of GFP gene induced by chicken vasa homologue (Cvh) promoter in early chicken embryos (2008)
  • 著者名/発表者名: Minematsu T, Harumi T and Naito M
  • 雑誌名: Molecular Reproduction and Development 巻: 75(10) ページ: 1515-1522
  • DOI: DOI:10.1002/mrd.20894
  • 査読あり
• [学会発表] GFP遺伝子を発現するニワトリ始原生殖細胞の作出とレシピエント胚生殖巣への導入 (2011)
  • 著者名/発表者名: 内藤 充・春海 隆・桑名 貴
  • 学会等名: 日本家禽学会2011年度秋季大会
  • 発表場所: 十和田
  • 年月日: 20110824-25
• [学会発表] PMEL17遺伝子を利用したニワトリ品種識別と生殖系列キメラ判別への応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 内藤 充・春海 隆・桑名 貴
  • 学会等名: 日本家禽学会2011年度春季大会
  • 発表場所: 厚木
  • 年月日: 2011-03-28
• [学会発表] In vitro culture of chicken primordial germ cells isolated from embryonic blood (2010)
  • 著者名/発表者名: Naito M, Harumi T and Kuwana T
  • 学会等名: XIIIth European Poultry Conference
  • 発表場所: Tours, France,
  • 年月日: 20100823-27
• [学会発表] Basic studies for transgenic chickens. (2010)
  • 著者名/発表者名: Naito M
  • 学会等名: International Workshop on Preservation of Avian Primordial Germ Cells and Its Usage
  • 発表場所: Okinawa, Japan,
  • 年月日: 20100126-28
• [学会発表] 始原生殖細胞を利用した鳥類の生殖制御法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 内藤 充
  • 学会等名: 第102回日本繁殖生物学会大会
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 20090909-12
• [図書] 発生工学日本農学80年史(分担) (2009)
  • 著者名/発表者名: 内藤 充
  • 総ページ数: 33.2(3)-238
  • 出版者: 養賢堂