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2010 年度 実績報告書

多包条虫の網羅的cDNA解析と寄生虫の増殖・分化の分子基盤とワクチン開発

研究課題

研究課題/領域番号 20380164
研究機関北海道大学

研究代表者

奥 祐三郎  鳥取大学, 農学部, 教授 (60133716)

研究分担者 松本 淳  日本大学, 生物資源科学部, 講師 (70296169)
八木 欣平  北海道立衛生研究所, 生物科学部, 衛生動物科長 (70414323)
キーワード多包条虫 / 網羅的cDNAライブラリー / 組み換えワクチン / RNA干渉 / in silico解析 / 発育段階 / QTL解析 / 寄生虫
研究概要

多包条虫の幼虫及び成虫の完全長cDNAライブラリーを網羅的に作成し、解析することにより、今後有用と思われるクローンを採取し、さらにそれらの有用性を検討することを目的とする。特に、重要と考えられる様々な遺伝子については、発現量、分泌抗原および膜関連分子その機能からワクチンおよび診断用抗原としての有用性を検討することを目的とする。さらに、機能解析のために、条虫におけるRNA干渉法を確立してきた。
本年度は特に以下の5点がポイントである。1)多包虫成虫のプロテオーム解析を行い、特に糖蛋白の重要性と診断用抗原としての有用性を示唆した。2)成虫および幼虫のマイクロアレイ解析を予定していたが、交差反応が予想される遺伝子がかなり多いことから、現在さらに検討中である。3)in silico解析の継続を行い、特に多包虫シスト周辺の宿主由来遺伝子を解析した。特に、抗体、オステオポンチン、フェリチン重鎖、リゾチームC、アポリポプロテインEなどが優性であることを示した。4)多包虫の原頭節および胚細胞を用いて、寄生虫の14-3-3およびAntigenll/3についてRNA干渉を行い、それらのmRNA量および蛋白量が有意に低下することを報告した。5)ワクチンの開発のために、様々な近交系のマウスにおける多包虫の発育を原頭節数を指標にし、さらに病理組織学的変化を比較した。抵抗性のC57BL/6と感受性のDBA2を選抜し、QTL解析を行った。さらに、これらの両マウスの感染経過に沿ったマイクロアレイ解析を現在進行中である。

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2011 2010

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Echinococcus multilocularis : Purification and characterizati on of glycoprotein antigens with serodiagnostic potential for canine infection.2011

    • 著者名/発表者名
      Kouguchi H, et al.
    • 雑誌名

      Exp Parasitol.

      巻: VOL.128 ページ: 50-56

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Development of PCR/dot blot assay for specific detection and differentiation of taeniid cestode eggs in canids.2011

    • 著者名/発表者名
      Armua-Fernandes MT, et al.
    • 雑誌名

      Parasitol.Int.

      巻: VOL.60 ページ: 84-89

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Gene silencing in Echinococcus multilocularis protoscoleces using RNA interference.2010

    • 著者名/発表者名
      Mizukami C, et al.
    • 雑誌名

      Parasitol.Int.

      巻: VOL.59 ページ: 647-652

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Echinococcus multilocularis primary cells : improved isolation, small-scale cultivation and RNA interference.2010

    • 著者名/発表者名
      Spiliotis M, et al.
    • 雑誌名

      Mol.Biochem.Parasitol.

      巻: VOL.174 ページ: 83-87

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Primary alveolar echinococcosis : Course of larval development and antibody responses in intermediate host rodents with different genetic backgrounds after oral infection with eggs of Echinococcus multilocularis.2010

    • 著者名/発表者名
      Matsumoto J, など
    • 雑誌名

      Parasitol. Int.

      巻: 59 ページ: 435-444

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 多包条虫(幼虫・成虫)のcDNAライブラリのin silico 解析 特にspliced leaderを有する遺伝子について2010

    • 著者名/発表者名
      奥祐三郎、など
    • 雑誌名

      獣医寄生虫学会

      巻: 8巻 ページ: 116

  • [雑誌論文] 種特異的オリゴプローブを用いた犬のテニア科条虫の同定と鑑別2010

    • 著者名/発表者名
      Armua Fernandez MT, など
    • 雑誌名

      獣医寄生虫学会

      巻: 8巻 ページ: 117

  • [学会発表] マウスにおける多包条虫シスト定着と原頭節発育に関与する宿主側遺伝的因子のQTL解析2011

    • 著者名/発表者名
      中尾亮、亀田弥生、孝口裕一、Yila Simon、松本淳、鳥越大輔、佐々木宣哉、奥祐三郎、杉本千尋、安居院高志、八木欣平
    • 学会等名
      第151回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      東京農工大学
    • 年月日
      2011-03-31
  • [学会発表] 多包虫感染コットンラットの腹腔内シスト塊由来cDNAライブラリーに含まれていた宿主由来cDNAの解析2010

    • 著者名/発表者名
      奥祐三郎、など
    • 学会等名
      第150回日本獣医学会学術集会
    • 発表場所
      帯広畜産大学
    • 年月日
      2010-09-17

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公開日: 2012-07-19  

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