多包条虫の網羅的cDNA解析と寄生虫の増殖・分化の分子基盤とワクチン開発

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20380164
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用獣医学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 奥 祐三郎 北海道大学, 農学部, 教授 (60133716)
• 研究分担者: 野中 成晃 宮崎大学, 農学部, 准教授 (50281853) ; 渡辺 純一 東京大学, 医科学研究所, 助教 (20201189) ; 杉本 千尋 北海道大学, 人獣共通感染症リサーチセンター, 教授 (90231373) ; 松本 淳 日本大学, 生物資源科学部, 講師 (70296169) ; 八木 欣平 北海道立衛生研究所, 生物科学部, 衛生動物科長 (70414323)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: エキノコックス / 網羅的cDNAライブラリー / RNA干渉 / 発育段階 / テトラスパニン / 組み換えワクチン / 糖蛋白 / in silico解析

研究概要

人において重篤な疾病を引き起こす多包条虫に関して、この寄生虫の幼虫(12,100クローン)および成虫(9,500クローン)の遺伝子(mRNA)を網羅的にコンピューター解析した。診断・予防・治療などに利用可能と予想された分子(テトラスパニン、糖蛋白なと)については、実験で調べ、有効であることを確認した。遺伝子の機能解析のために、RNA干渉法が様々な生物で利用されているが、我々は条虫のRNA干渉法を確立した。

研究成果

• [雑誌論文] Echinococcus multilocularis : purification and characterization of glycoprotein antigens with serodiagnostic potential for canine infection. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kouguchi H, Matsumoto J, Yamano K, Katoh Y, Oku Y, Suzuki T, Yagi K
  • 雑誌名: Exp Parasitol. 128(1) ページ: 50-56
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of PCR/dot blot assay for specific detection and differentiation of taeniid cestode eggs in canids. (2011)
  • 著者名/発表者名: Armua-Fernandez MT, Nonaka N, Sakurai T, Nakamura S, Gottstein B, Deplazes P, Phiri IG, Katakura K, Oku Y.
  • 雑誌名: Parasitol Int. 60(1) ページ: 84-89
  • 査読あり
• [雑誌論文] 多包条虫(幼虫・成虫)のcDNAライブラリのin silico解析特にspliced leaderを有する遺伝子について (2010)
  • 著者名/発表者名: 奥祐三郎、八木欣平、原雄一郎、渡辺日出海、李爽、山下理宇、若栗浩幸、鈴木穣、豊田敦、渡辺純一
  • 雑誌名: 獣医寄生虫学会 8巻 ページ: 116
• [雑誌論文] 種特異的オリゴプローブを用いた犬のテニア科条虫の同定と鑑別 (2010)
  • 著者名/発表者名: Armua-Fernandez MT, Nonaka N, Sakurai T, Nakamura S, Gottstein B, Deplazes P, Phiri IG, Katakura K, Oku Y.
  • 雑誌名: 獣医寄生虫学会 8巻 ページ: 117
• [雑誌論文] Gene silencing in Echinococcus multilocularis protoscoleces using RNA interference. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mizukami C, Spiliotis M, Gottstein B, Yagi K, Katakura K, Oku Y.
  • 雑誌名: Parasitol Int. 59(4) ページ: 647-652
  • 査読あり
• [雑誌論文] Echinococcus multilocularis primary cells : improved isolation, small-scale cultivation and RNA interference. (2010)
  • 著者名/発表者名: Spiliotis M, Mizukami C, Oku Y, Kiss F, Brehm K, Gottstein B.
  • 雑誌名: Mol Biochem Parasitol. 174(1) ページ: 83-87
  • 査読あり
• [雑誌論文] Primary alveolar echinococcosis : course of larval development and antibody responses in intermediate host rodents with different genetic backgrounds after oral infection with eggs of Echinococcus multilocularis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto J, Kouguchi H, Oku Y, Yagi K
  • 雑誌名: Parasitol Int. 59(3) ページ: 435-444
  • 査読あり
• [雑誌論文] Echinococcus multilocularis : two-dimensional Western blotting method for the identification and expression analysis of immunogenic proteins in infected dogs. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kouguchi H, Matsumoto J, Katoh Y, Suzuki T, Oku Y, Yagi K
  • 雑誌名: Exp Parasitol. 124(2) ページ: 238-243
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Echinococcus multilocularis coproantigen is a surface glycoprotein with unique O-gycosylation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hulsmeier AJ, Deplazes P, Naem S, Nonaka N, Hennet T, Kohler P.
  • 雑誌名: Glycobiology. 20(1) ページ: 127-135
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of Echinococcus multilocularis tetraspanins as vaccine candidates against primary alveolar echinococcosis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Dang Z, Yagi K, Oku Y, Kouguchi H, Kajino K, Watanabe J, Matsumoto J, Nakao R, Wakaguri H, Toyoda A, Sugimoto C.
  • 雑誌名: Vaccine. 27(52) ページ: 7339-7345
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiplex PCR system for identifying the carnivore origins of faeces for an epidemiological study on Echinococcus multilocularis in Hokkaido, Japan. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nonaka N, Sano T, Inoue T, Teresa Armua M, Fukui D, Katakura K, Oku Y.
  • 雑誌名: Parasitol Res. 106(1) ページ: 75-83
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular cloning and characterization of a T24-like protein in Echinococcus multilocularis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Dang Z, Watanabe J, Kajino K, Oku Y, Matsumoto J, Yagi K, Kouguchi H, Sugimoto C.
  • 雑誌名: Mol Biochem Parasitol. 168(1) ページ: 117-119
  • 査読あり
• [雑誌論文] Monitoring of environmental contamination by Echinococcus multilocularis in an urban fringe forest park in Hokkaido, Japan. (2009)
  • 著者名/発表者名: Lagapa JT, Oku Y, Kaneko M, Ganzorig S, Ono T, Nonaka N, Kobayashi F, Kamiya M.
  • 雑誌名: Environ Health Prev Med. 14(5) ページ: 299-303
  • 査読あり
• [雑誌論文] Echinococcus multilocularis infection in pet dogs in Japan. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nonaka N, Kamiya M, Kobayashi F, Ganzorig S, Ando S, Yagi K, Iwaki T, Inoue T, Oku Y.
  • 雑誌名: Vector Borne Zoonotic Dis. 9(2) ページ: 201-206
  • 査読あり
• [雑誌論文] A vague understanding of the biology and epidemiology of echinococcosis by dog owners in Hokkaido, an endemic island for Echinococcus multilocularis in Japan. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nonaka N, Kamiya M, Oku Y.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 71(1) ページ: 105-107
  • 査読あり
• [雑誌論文] The first instance of a cat excreting Echinococcus multilocularis eggs in Japan. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nonaka N, Hirokawa H, Inoue T, Nakao R, Ganzorig S, Kobayashi F, Inagaki M, Egoshi K, Kamiya M, Oku Y.
  • 雑誌名: Parasitol Int. 57(4) ページ: 519-520
  • 査読あり
• [学会発表] マウスにおける多包条虫シスト定着と原頭節発育に関与する宿主側遺伝的因子のQTL解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中尾亮、亀田弥生、孝口裕一、Yila Simon、松本淳、鳥越大輔、佐々木宣哉、奥祐三郎、杉本千尋、安居院高志、八木欣平
  • 学会等名: 第151回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 東京農工大学
  • 年月日: 2011-03-31
• [学会発表] 多包虫感染コットンラットの腹腔内シスト塊由来cDNA ライブラリーに含まれていた宿主由来cDNAの解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 奥祐三郎、八木欣平、原雄一郎、渡辺日出海、李爽、山下理宇、若栗浩幸、鈴木穣、豊田敦、渡辺純一
  • 学会等名: 第150回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 帯広畜産大学
  • 年月日: 2010-09-17
• [学会発表] In silico analyses of full-length rich cDNA libraries of larval and adult Echinococcus multilocularis (Preliminary results). (2009)
  • 著者名/発表者名: Oku Y., Armua-Fernandez M.T., Yagi Y, et al
  • 学会等名: Workshop on "Recent advances in the biology and biochemistry of Echinococcus infections", in the context of the XXIII World Congresss of Hydatidosis.
  • 発表場所: Hotel Raisson, Colonia del Sacramento, Uruguay
  • 年月日: 2009-12-10
• [学会発表] RNA interference (RNAi) methods for protoscoleces and primary cells of Echinococcus multilocularis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mizukami, C., Spiliotis M., Gottstein, B., Katakura, K., Oku, Y
  • 学会等名: The XXIII World Congresss of Hydatidosis.
  • 発表場所: Hotel Raisson, Colonia del Sacramento, Uruguay
  • 年月日: 2009-12-10
• [学会発表] DNA dot blot assay for the differentiation of Taeniid cestodes in canids. (2009)
  • 著者名/発表者名: Armua-Fernandez, M.T., Nonaka, N., Sakurai, T., Gosttstein, B., Deplazes, P., Katakura, K., Oku, Y
  • 学会等名: The XXIII World Congresss of Hydatidosis.
  • 発表場所: Hotel Raisson, Colonia del Sacramento, Uruguay
  • 年月日: 2009-12-10
• [学会発表] 幼虫および成虫の多包条虫cDNAライブラリーに多く見られたcDNAのin silico解析、特にAntigenBとLSU rRNAについて (2009)
  • 著者名/発表者名: 奥祐三郎、八木欣平、原雄一郎、渡辺日出海、李爽、山下理宇、若栗浩幸、鈴木穣、豊田敦、渡辺純一
  • 学会等名: 第55回日本寄生虫学会・日本衛生動物学会
  • 発表場所: 帯広市 帯広畜産大学
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] Discrimination of taeniid cestodes in canids by using species -specific oligonucleotide probes (2009)
  • 著者名/発表者名: Armua-Fernandez, M.T., Nonaka, N., Sakurai, T., Katakura,K., Oku,Y.
  • 学会等名: 第55回日本寄生虫学会・日本衛生動物学会
  • 発表場所: 帯広市 帯広畜産大学
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] 多包条虫(幼虫・成虫)のcDNAライブラリーのin silico解析 特にSpliced Leaderを有する遺伝子について (2009)
  • 著者名/発表者名: 奥祐三郎、八木欣平、原雄一郎、渡辺日出海、李爽、山下理宇、若栗浩幸、鈴木穣、豊田敦、渡辺純一
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 鳥取市 鳥取市民会館
  • 年月日: 2009-09-26
• [学会発表] 人と動物の共通感染症:エキノコックス症の問題解決に向けて (2009)
  • 著者名/発表者名: 奥祐三郎
  • 学会等名: 第32回日本骨・関節感染症学会(特別講演)招待講演
  • 発表場所: 札幌市京王プラザホテル(シーガイヤ)
  • 年月日: 2009-06-19
• [学会発表] 多包虫のcDNAライブラリに見られた抗酸化活性関連遺伝子 (2009)
  • 著者名/発表者名: 平松澪、水上智秋、松本淳、野中成晃、片倉賢、李爽、山下理宇、渡辺純一、神谷正男、奥祐三郎
  • 学会等名: 第78回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 東京 法政大学市ヶ谷キャンパス
  • 年月日: 2009-03-28
• [学会発表] 遺伝子工学的手法を用いた多包虫に対する組換えモノクローナル抗体の作成 (2009)
  • 著者名/発表者名: 後藤明子、八木欣平、山野公明
  • 学会等名: 第78回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 東京 法政大学市ヶ谷キャンパス
  • 年月日: 2009-03-28
• [学会発表] Control of echinococcus and molecular biology (2008)
  • 著者名/発表者名: 奥祐三郎
  • 学会等名: Parasite Vector Genomics II in Sapporo
  • 発表場所: Sapporo, Hokkaido Univ.
  • 年月日: 2008-10-22
• [学会発表] 多包条虫の網羅的cDNAライブラリのin silico解析、特にプロテアーゼ類について (2008)
  • 著者名/発表者名: 奥祐三郎、李爽、山下理宇、渡辺純一、野中成晃、神谷正男
  • 学会等名: 第146回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 宮崎市 ワールドコンベンションセンターサミット(シーガイヤ)
  • 年月日: 2008-09-25
• [学会発表] ザンビアの牛から検出された単包条虫のgenotypeについて (2008)
  • 著者名/発表者名: 中村星太、野中成晃、I.G.KPhiri、C.Mwelwa、井上貴史、松本淳、片倉賢、奥祐三郎
  • 学会等名: 第146回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 宮崎市 ワールドコンベンションセンターサミット
  • 年月日: 2008-09-25
• [備考] ホームページ等
• [備考] フルエキノコック
  • URL: http://fullmal.hgc.jp/em/