RSウイルス感染によるアレルギー発症における分子遺伝子マーカーの同定と予防法

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20390170
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 中村 裕之 金沢大学, 医学系, 教授 (30231476)
• 研究分担者: 人見 嘉哲 金沢大学, 医学系, 准教授 (70231545) ; 神林 康弘 金沢大学, 医学系, 講師 (20345630) ; 日比野 由利 金沢大学, 医学系, 助教 (40362008)
• キーワード: アレルギー / RSウイルス / ワクチン / S糖タンパク遺伝子 / CdGモチーフ / 喘息 / 予防 / Th2サイトカイン

研究概要

ごく最近のアレルギーの予防には、従来の衛生仮説に取って代わり、RSVの感染に対する予防および早期発見の重要性が唱えられてはいるか有効な方法は見出されてはいない。本研究では、RSV感染における好酸球を中心とした分子機構を明らかにするとともに、分子機構の解明から導かれる新しい免疫療法として、RSウイルス由来のS糖タンパク遺伝子を用いたアレルギー症予防DNAワクチンを開発することを目的とした。本年度の研究では、動物実験とワクチン設計から成る。
動物実験では、高IgE産生系マウスとして知られているBALB/cマウス6匹を1群として、4群、計24匹に対して、RSV前投与と後投与の有無で4群とし、RSVの投与が無い群では、不活化RSVを投与した。その結果、RSVによるアレルギー発症の分子メカニズムとして、樹状細胞のTh2サイトカイン(IL4,IL5,IL10,IL13)の活性化が重要であることが遺伝子発現とプロテオーム解析によって認められた。
ワクチン設計では、DNAワクチンは、RSウイルス由来のS糖タンパク遺伝子が、IL2のシグナル配列とヒト胎盤アルカリホスファターゼのC末端膜貫通ドメインの間に目的遺伝子をクローニングした結果、細胞表層に提示、認識されるようになった。この際、SV40エンハンサーの付加により、非分裂細胞において核内に輸送されたプラスミドの遺伝子発現レベルを向上させることができた。さらに、E.coliにおけるpVACの複製と選択に必須のバクテリアに特徴的な配列として、Ori遺伝子の最小化や、CpGフリーのゼオシン耐性遺伝子(Sh ble-ΔCpG)を構築することによって、免疫原となるCpGモチーフの数を減じることが認められた。今回、開発されたRSウイルス由来のS糖タンパク遺伝子を用いたアレルギー症予防DNAワクチンの有効性を次年度は動物実験によって証明する。

研究成果

• [雑誌論文] 環境中化学物質によるアレルギー発症機序の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村裕之、人見嘉哲、弘田量二
  • 雑誌名: アレルギーの臨床 (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] 環境中化学物質によるアレルギー発症機序の解明と予防 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村裕之、人見嘉哲、弘田量二
  • 雑誌名: 臨床免疫・アレルギー科 53(1) ページ: 42-47
  • 査読あり
• [雑誌論文] スギ花粉症特異的QOLを用いたスギ花粉症予防・治療法の経済的評価(J) (2009)
  • 著者名/発表者名: 山崎真平、人見嘉哲、神林康弘、日比野由利、中村裕之
  • 雑誌名: 日本予防医学会雑誌 4(3) ページ: 29-34
  • 査読あり
• [雑誌論文] The association of sense of coherence and coping profile with stress among research park city workers in Japan. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tomotsune Y, Sasahara S, Umeda T, Hayashi M, Usami K, Yoshino S, Kageyama T, Nakamura H, Matsuzaki I.
  • 雑誌名: Ind Health 47(6) ページ: 664-672
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association between altered systemic inflammatory interleukin-1beta and natural killer cell activity and subsequently agitation in patients with alzheimer disease. (2009)
  • 著者名/発表者名: Higuchi M, Hatta K, Honma T, Hitomi YH, Kambayashi Y, Hibino Y, Matsuzaki I, Sasahara S, Nakamura H.
  • 雑誌名: Int J Geriatr Psychiatry
  • 査読あり
• [雑誌論文] Common risk factors for changes in body weight and psychological well being in Japanese male middle-aged workers. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sagara T, Hitomi Y, Kambayashi Y, Hibino Y, Matsuzaki I, Sasahara S, Ogino K, Hatta K, Nakamura H.
  • 雑誌名: Environ Health Prev Med 14 ページ: 319-327
  • 査読あり
• [雑誌論文] 環境因子とアレルギー (2009)
  • 著者名/発表者名: 中村裕之、人見嘉哲
  • 雑誌名: 日本臨床 67(11) ページ: 2043-2047
  • 査読あり
• [雑誌論文] Low serum secretory immunoglobulin A level and sense of coherence score at an early gestational stage as indicators for subsequent threatened premature birth. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sekizuka N, Sakai A, Shimada K, Tabuchi N, Kameda Y, Nakamura H.
  • 雑誌名: Environ Health Prev Med 14(5) ページ: 276-283
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between the Noto-Peninsula earthquake and maternal post natal depression and child-rearing. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hibino Y, Takaki J, Kambayashi Y, Hitomi Y, Sakai A, Sekizuka N, Ogino K, Nakamura H.
  • 雑誌名: Environ Health Prev Med 14(5) ページ: 255-260
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effectiveness of second- generation antipsychotics with acute-phase schizophrenia. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hatta K, Sato K, Hamakawa H, Takebayashi H, Kimura N, Ochi S, Sudo Y, Asukai N, Nakamura H, Usui C, Kawabata T, Hirata T, Sawa Y.
  • 雑誌名: Schizophr Res 113 ページ: 49-55
  • 査読あり
• [雑誌論文] Medical and psychiatric comorbidity in psychiatric beds in general hospitals : a cross-sectional study in Tokyo. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hatta K, Nakamura H, Usui C, Kobayashi T, Kamijo Y, Hirata T, Awata S, Kishi Y, Arai H, Kurosawa H.
  • 雑誌名: Psychiatry Clin Neurosci 63(3) ページ: 329-335
  • 査読あり
• [雑誌論文] (2009)
  • 著者名/発表者名: 中村裕之
  • 雑誌名: 運動と免疫:からだをまもる運動のふしぎ(NAP) ページ: 70-73
• [学会発表] ストレスによるマウス血漿総抗酸化能、抗酸化物質濃度の変化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 人見嘉哲、辻本藤太郎、石神昭人、近藤嘉高、神林康弘、弘田量二、日比野由利、柴田亜樹、中村裕之
  • 学会等名: 第9回分子予防環境医学研究会
  • 発表場所: 東京大学(東京都)
  • 年月日: 2010-01-23
• [学会発表] Lipopolysaccharide(LPS)投与マウス敗血症モデルにおける血漿中抗酸化物質濃度と総抗酸化能の変化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 辻本藤太郎、人見嘉哲、神林康弘、日比野由利、柴田亜樹、中村裕之
  • 学会等名: 第7回日本予防医学会学術総会
  • 発表場所: 千葉大学(千葉県)
  • 年月日: 2009-12-13
• [学会発表] 日本語版ECRHS調査票を用いた全国成人喘息有病率調査 (2009)
  • 著者名/発表者名: 福冨友馬、小林章雄、中村裕之、西村正治、河岸由紀男、谷口正実、高橋清、烏帽子田彰、小田嶋博、中川武正、秋山一男、赤澤晃
  • 学会等名: 第59回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 秋田ビューホテル(秋田県)
  • 年月日: 2009-10-30