新規性分化・生殖機能異常責任遺伝子MAMLD1変異による疾患成立機序の解明

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20390265
• 研究機関: 独立行政法人国立成育医療研究センター
• 研究代表者: 深見 真紀 独立行政法人国立成育医療研究センター, 分子内分泌研究部, 室長 (40265872)
• 研究分担者: 和田 友香 独立行政法人国立成育医療研究センター, 分子内分泌研究部, 研究員 (80399485)
• キーワード: 生殖内分泌学 / 性分化 / 性ホルモン / ステロイド / MAMLD1

研究概要

本研究の目的は、われわれが同定した新規性分化・生殖機能異常責任遺伝子MAMLD1の生体内機能を解明することである。平成22年度には下記の成果が得られた。
1.新規変異陽性患者の同定:欧米人性分化疾患患者において新規MAMLD1機能低下変異を同定し、MAMLD1異常が人種を越えた性分化疾患の原因遺伝子であることを明確にした。また、MAMLD1変異陽性患者の中核症状は尿道下裂と停留精巣であり、明らかな遺伝子型-表現型相関は認められないことを明らかとした。
2.変異陽性患者の臨床像の解明:無機能型変異陽性患者を対象とした出生時から思春期までの経時的臨床解析によって、MAMLD1機能低下が、出生時の外性器異常のみならす、思春期の男性ホルモン産生障害を招く可能性を見出した。さらに、変異陽性患者において高頻度に精巣内微細石灰化が認められることを明らかとし、MAMLD1が精子形成障害および不妊症の発症にも関与する可能性を見出した。
3.MAMLD1細胞内機能の解明:ステロイド産生機能を有するマウスLeydig腫瘍細胞(MLTC1)を用いて、siRNAによるMamld1一過性発現抑制を行い、MAMLD1/Mamld1がステロイド産生に及ぼす効果を検討した。マイクロアレイ解析、ウエスタンブロッティングおよび定量PCRを用いた発現解析の結果、Mamld1がCyp17a1のmRNA発現制御を介してテストステロン産生を修飾することが明らかとなった。なお、われわれは過去にMAMLD1がSF1による制御を受ける可能性を見出している。これらの成績は、精巣でのテストステロン産生調節におけるSF1-MAMLD1-CYP17A1系の関与を示唆する。

研究成果

• [雑誌論文] Mamld1 knockdown reduces testosterone production and Cyp17al expression in mouse Leydig tumor cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakamura M, Fukami M, Sugawa F, Miyado M, Nonomura K, Ogata T
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Exonic polymorphisms of MAMLD1 (CXorf6) are associated with hypospadias. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kalfa N, Cassorla F, Abdennabi IO, Audran F, Philibert P, Daures JP, Baskin L, Fukami M, Ogata T, Sultan C
  • 雑誌名: J Urol 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aromatase Excess Syndrome : Identification of Cryptic Duplications and Deletions Leading to Gain-of-Function of CYP19A1 and Assessment of. Phenotypic Determinants. (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukami M, Shozu M, Soneda S, Kato F, Inagaki A, Takagi H, Hanaki K, Kanzaki S, Ohyama K, Sano T, Nishigaki T, Yokoya S, Binder G, Horikawa R, Ogata T
  • 雑誌名: J Clin Endocrinol Metab 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anorectal and urinary anomalies and aberrant retinoic acid metabolism in cytochrome P450 xidoreductase deficiency (2010)
  • 著者名/発表者名: Fukami M, Nagai T, Mochizuki H, Muroya K, Yamada G, Takitani K, Ogata T
  • 雑誌名: Mol Genet Metab 巻: 100(3) ページ: 269-273
  • 査読あり
• [雑誌論文] 性分化異常症発症責任遺伝子MAMLD1の臨床的および分子遺伝学的解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 深見真紀、和田友香、上松あゆ美、長谷川奉延、緒方勤
  • 雑誌名: ホルモンと臨床 巻: 57(12) ページ: 1025-1029
• [雑誌論文] Hypothalamic dysfunction in a female with isolated hypogonadotropic hypogonadism and compound heterozygous TACR3 mutations and clinical manifestation in her heterozygous mother. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fukami M, Maruyama T, Yoshimura Y, Ogata T
  • 雑誌名: Horm Res Paediatr 巻: 73(6) ページ: 477-481
  • 査読あり
• [学会発表] Impaired expression of Mamld1 disturbs the gene expression of steroidogenic enzymes. (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮戸真美, 中村美智子, 深見真紀, 宮戸健二, 緒方勤
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20101207-20101210
• [学会発表] ステロイドホルモン産生におけるMamld1の機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮戸真美, 中村美智子, 深見真紀, 宮戸健二, 緒方勤
  • 学会等名: 第44回日本小児内分泌学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20101007-20101009
• [学会発表] MAMLD1 mutations and impaired testosterone production : phenotypic analysis of mutation-positive patients and knockout mice and in vitro functional assays. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fukami M, Wada Y, Nakamura M, Miyado M, Ogata T.
  • 学会等名: The 49th Annual Meeting of European Society for Paediatric Endocrinology
  • 発表場所: Prague
  • 年月日: 20100922-20100925
• [学会発表] MAMLD1 mutations : how do they lead to hypospadias? (2010)
  • 著者名/発表者名: Fukami M
  • 学会等名: International Symposium on Pediatric Endocrinology.
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 20100330-20100401
• [学会発表] 小児内分泌疾患の分子診断 (2010)
  • 著者名/発表者名: 深見真紀
  • 学会等名: 第142回染色体研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-06-11
• [備考]
  • URL: http://www.nch.go.jp/endocrinology/index.htm