| 研究課題/領域番号 |
20390268
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| 研究機関 | 山梨大学 |
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研究代表者 |
尾崎 由基男 山梨大学, 大学院・医学工学総合研究部, 教授 (30134539)
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| 研究分担者 |
井上 克枝 山梨大学, 大学院・医学工学総合研究部, 准教授 (10324211)
井上 修 山梨大学, 大学院・医学工学総合研究部, 助教 (00432154)
佐藤 金夫 山梨大学, 医学部, 助手 (20242662)
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| キーワード | 血小板 / CLEC-2 / podoplanin / 動脈硬化 / 動脈血栓症 |
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| 研究概要 |
【目的】我々はCLEC-2という新規血小板活性化受容体を見出した。腫瘍細胞の膜蛋白であるポドプラニンは、血小板凝集を惹起して癌の転移を促進する。我々はその血小板上受容体がCLEC-2であり、CLEC-2が癌の転移を促進することを示した。本研究課題ではCLEC-2/ポドプラニンの相互作用が血栓症発症にも関与する可能性を検証する。期間内に1.ポドプラニンが動脈硬化部位に発現するか、2.発現していれば、その血栓形成における役割、3.CLEC-2欠損マウスを使用して、CLEC-2自体の血栓止血における役割、を明らかにする。【本年度の成果】動脈硬化部位の病理標本では、平滑筋と思われる細胞に一致して、抗ポドプラニン抗体と組換CLEC-2の結合が認められ、動脈硬化部位でポドプラニンが発現している可能性が示唆された。しかし培養血管平滑筋細胞には、組換CLEC-2が結合するものの、ポドプラニンの発現は認められなかった。これより未知のCLEC-2リガンドが平滑筋に存在する可能性があり、その同定に着手した。昨年度はCLEC記2ノックアウトマウス(KO)を作製し、CLEC-2が血小板活性化依存性にホモフィリックに結合して血栓を安定化することを示した(胎生致死のため、放射線照射CLEC-2キメラを使用)。本年度はレーザーと塩化鉄で頸動脈を傷害して血管閉塞時間を測定したところ、レーザーではCLEC-2キメラと野生型キメラで同程度であったが、塩化鉄ではCLEC-2キメラで有意に閉塞時間が延長していた。これよりCLEC-2は、血栓を安定化させるだけでなく、塩化鉄で血管平滑筋が露出する程度に深く傷害された場合には平滑筋上の未知のリガンドと結合して積極的に血栓形成に関与することが示唆された。本年度はCLEC-2とアポEのダブルKOも作製する予定であったが前者が胎生致死のため,研究期間内の実現は断念した。
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