| 研究課題/領域番号 |
20390286
|
|---|
| 研究機関 | 富山大学 |
|---|
研究代表者 |
村口 篤 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 教授 (20174287)
|
|---|
| 研究分担者 |
岸 裕幸 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 准教授 (60186210)
小澤 龍彦 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 助教 (10432105)
北島 勲 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 教授 (50214797)
二階堂 敏雄 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 教授 (50180568)
|
|---|
| キーワード | リンパ球チップ / 抗体産生細胞 / 抗体遺伝子 / リコンビナント抗体 / インフルエンザウイルス / B型肝炎ウイルス / 中和抗体 / 抗体医薬 |
|---|
| 研究概要 |
本年度の研究実績は以下のとおりである。
1.リンパ球チップで抗体分泌細胞の直接検出する方法(ISAAC法)の開発と実証:リンパ球チップ内の抗体分泌細胞が分泌する抗体を直接検出する方法として、チップに抗ヒト/マウス抗体をコートする方法とチップに抗原をコートする方法が考えられる。本年度は、この2つの方法で、HEL抗体トランスジェニックマウス脾細胞から、HEL抗体分泌細胞を高感度かつ効率的に検出できる方法を確立した。さらに、この系をヒト末梢血の抗体産生細胞の検出に応用し、ヒトのISAAC/FLISPOT法を開発した。さらに、この方法を用いて、ワクチン接種したボランティアの末梢血から、多数の肝炎ウイルスあるいはインフルエンザウイルスに対するヒトモノクローナル抗体を迅速に作製することに成功し、ISSAC法の臨床応用を実証した。
2.B型肝炎ウイルス(HBV)のin vitro中和能の測定と臨床応用:HBVの中和実験にはヒトの初代肝細胞が必要であり、測定は容易ではない。ヒト肝臓を移植したマウスモデルがあるが、高値である。我々は、ヒト肝細胞癌由来のHepaRG細胞株を用いて、短期間にin vitroでHBVの中和能を測定する方法を確立した。すなわち、HepaRG細胞株にHBVを抗体の存在下で感染させ、細胞内あるいは培養液中のHBVウイルス量の変化をリアルタイムPCR法で調べることで、HBV抗体の中和能をin vitroで調べることが可能となった。この方法を用いて、上記(1)で得られた多くのヒト型抗HBV抗体の中和能を測定し、その結果、多くの中和抗体をin vitroで検出することに成功した。
|
