「リンパ球チップ」を用いた感染症・細菌兵器に対する新たな抗体医療戦略

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20390286
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 感染症内科学
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 村口 篤 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (20174287)
• 研究分担者: 岸 裕幸 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 准教授 (60186210) ; 小澤 龍彦 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 助教 (10432105) ; 北島 勲 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (50214797) ; 二階堂 敏雄 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (50180568)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: リンパ球チップ / 抗体医療 / 抗体遺伝子

研究概要

我々が開発したリンパ球チップの応用として、マイクロウエル内の抗体分泌細胞の分泌する抗体を直接検出する方法(ISAAC/FLISPOT)法をマウスの実験系で開発し、この系をヒトに応用して、ワクチン接種したボランティアの末梢血から、肝炎ウイルスとインフルエンザウイルスに対する高品質のヒト抗体を極めて迅速(1週間以内)に作製することに成功した。また、B型肝炎ウイルス(HBV)のin vitro迅速中和能検定法を開発し、ヒト抗HBs抗体が認識するHBs抗原のエピトープとHBV中和能との連関を明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Generation of TRAIL-receptor 1-specific human monoclonal Ab by a combination of immunospot array assay on a chip and human Ab-producing mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Jin A., Ozawa T., Tajiri K., Lin Z., Obata T., Ishida I., Kishi H., Muraguchi A.
  • 雑誌名: Eur.J.Immunol. 40 ページ: 3591-3593
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of the epitope and neutralizing capacity of human monoclonal antibodies induced by hepatitis B vaccine. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tajiri K., Ozawa T., Jin A., Tokimitsu Y., Minemura M., Kishi H., Sugiyama T., Muraguchi A.
  • 雑誌名: Antiviral.Res. 87 ページ: 40-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Post-translational modification of TRAIL receptor type 1 on various tumor cells and the susceptibility of tumors to TRAIL-induced apoptosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Lin Z., Jin A., Ozawa T., Tajiri K., Obata T., Ishida I., Jin F., Kishi H., Muraguchi A.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 395 ページ: 251-257
  • 査読あり
• [雑誌論文] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: Jin A.-S., Ozawa T., Tajiri K., Obata T., Kondo S., Kinoshita K., Kadowaki S., Takahashi K., Sugiyama T., Kishi H., Muraguchi A.
  • 雑誌名: Nat.Med. 15 ページ: 1088-1092
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of antigen-specific B cells by concurrent monitoring of intracellular Ca^<2+> mobilization and antigen binding with microwell array chip system equipped with a CCD imager. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita K., Ozawa T., Tajiri K., Kadowaki S., Kishi H., Muraguchi A.
  • 雑誌名: Cytometry Part A 75A ページ: 682-687
  • 査読あり
• [雑誌論文] SFMAC : A novel method for analyzing multiple parameters on lymphocytes with a single fluorophore in cell-microarray system. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tajiri K., Kishi H., Ozawa T., Sugiyama T., Muraguchi A.
  • 雑誌名: Cytometry Part A 75A ページ: 282-288
  • 査読あり
• [雑誌論文] MAC-CCD system : a novel lymphocyte microwell-array chip system equipped with CCD scanner to generate human monoclonal antibodies against influenza virus. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T., Kinoshita K., Kadowaki S., Tajiri K., Kondo S., Honda R., Ikemoto M., Piao L.-X., Morisato A., Fukurotani K., Kishi H., Muraguchi A.
  • 雑誌名: Lab on a Chip 9 ページ: 158-163
  • 査読あり
• [学会発表] Characterization of human anti-influenza M2 antibody obtained from peripheral blood of vaccinated volunteer. (2011)
  • 著者名/発表者名: Muraguchi A., Ozawa T., Jin A., Tajiri K., Takemoto M., Okuda T., Shiraki K., Kishi H.
  • 学会等名: Keystone Symposia
  • 発表場所: Keystone, USA.
  • 年月日: 20110206-20110211
• [学会発表] Isolation and characterization of a fully human monoclonal antibody against extracellular domain of matrix protein 2 of influenza A virus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T., Jin A., Tajiri K., Takemoto M., Okuda T., Shiraki K., Kishi H., Muraguchi A.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Conferences Asia
  • 発表場所: Suzhou, China.
  • 年月日: 20101107-20101110
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-receptor 1 specific human mAbs generated by Immunospot array assay on a chip. (2010)
  • 著者名/発表者名: Jin A., Ozawa T., Tajiri K., Lin Z., Kishi H., Muraguchi A.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Conferences Asia
  • 発表場所: Suzhou, China.
  • 年月日: 20101107-20101110
• [学会発表] Enhancement of TRAIL-induced apoptosis with novel TRAIL-R1-specific human mAbs generated by immunospot array assay on a chip. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kishi H., Jin A., Ozawa T., Tajiri K., Lin Z., Obata T., Ishida I., Muraguchi A.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe.
  • 年月日: 20100822-20100827
• [学会発表] Characterization of human anti-influenza M2 antibody obtained from peripheral blood of vaccinated volunteer. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ozawa T., Jin A., Tajiri K., Shiraki K., Kishi H., Muraguchi A.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe.
  • 年月日: 20100822-20100827
• [学会発表] Detection of antigen-specific T-cell response on the single cell-basis with microwell array chip. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kishi H., Tajiri K., Hatakeyama S., Kobayashi E., Horii M., Jin A., Ozawa T., Muraguchi A.
  • 学会等名: 4th Measuring Antigen-Specific Immune Response (MASIR) Conference
  • 発表場所: Mykonos, Greece.
  • 年月日: 20100609-20100612
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: 小澤龍彦, 金艾順, 田尻和人, 小幡勤, 近藤佐千子, 木下耕史, 門脇慎一, 高橋和郎, 杉山敏郎, 岸裕幸, 村口篤
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20091209-20091212
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: 金艾順, 小澤龍彦, 田尻和人, 岸裕幸, 村口篤
  • 学会等名: IBC's 20th Annual International Conference Antibody Engineering
  • 発表場所: San Diego, USA.
  • 年月日: 20091206-20091210
• [学会発表] 単一細胞レベルにおけるB細胞受容体シグナル解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岸裕幸, 小澤龍彦, 田尻和人, 村口篤
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20091202-20091204
• [学会発表] Isolation of human anti-influenza M2 antibody from peripheral blood of healthy volunteer. (2009)
  • 著者名/発表者名: 小澤龍彦, 田尻和人, 金艾順, 岸裕幸, 村口篤
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20091202-20091204
• [学会発表] A rapid and efficient single-cell manipulation method for screening antigen-specific antibody-secreting cells from human peripheral blood. (2009)
  • 著者名/発表者名: 金艾順, 小澤龍彦, 田尻和人, 岸裕幸, 村口篤
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20091202-20091204
• [学会発表] Extracellular loop domain of small (S)-HBsAg play a major role in preventing the infection of HBV : the result from omprehensive analysis of monoclonal antibodies obtained from S-HBsAg-vaccinated healthy individuals. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tajiri K., Ozawa T., Jin A.-S., Tokimitsu Y., Nakayama Y., Minemura M., Kishi H., Sugiyama T., Muraguchi A.
  • 学会等名: The 8th JSH Single Topic Conference
  • 発表場所: Tokyo.
  • 年月日: 20091121-20091122
• [学会発表] B-cell receptor signal analysis at single cell levels using a microwell-array chip. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita K., Kishi H., Fukurotani K., Honda R., Ozawa T., Tajiri K., Muraguchi A.
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Meeting
  • 発表場所: New York.
  • 年月日: 20091111-20091114
• [学会発表] Microwell arrays for detecting single, antigen-specific B-lineage cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: 岸裕幸
  • 学会等名: IBC's 19th Annual International Conference Antibody Engineering
  • 発表場所: San Diego.
  • 年月日: 20081207-20081211
• [学会発表] マイクロウェルアレイチップを用いた抗原特異的T細胞の検出 (2008)
  • 著者名/発表者名: 岸裕幸, 田尻和人, 小澤龍彦, 金艾順, 村口篤
  • 学会等名: 第38回日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20081201-20081203